目的 建立胆汁动态研究动物模型，可在动物本身胆汁酸池不变的情况下，于同一个体长期动态观察胆汁成分变化；利用该模型以及细胞培养技术，进一步研究胆色素钙结石的形成机制，同时观察清热利湿中药对胆色素钙结石形成的影响。方法1． 建立胆汁动态研究家兔模型，利用生化方法动态观察模型胆汁成分变化(包括胆红素、胆汁酸、钙离子等)。2． 待胆汁动态研究家兔模型稳定后，随机分为生理盐水组、不全梗阻组、细菌感染组、内毒素组、细菌感染加不全梗阻、内毒素加不全梗阻六组，动态观察各组胆汁成分变化(包括胆红素、胆汁酸、钙离子)。3． 待胆汁动态研究家兔模型稳定后，随机分为细菌感染组、内毒素组、细菌感染加中药组、内毒素加中药组、生理盐水组五组，并在给药组中按照成人剂量20倍同时给予清热利湿中药制剂。动态观察胆汁成分变化(包括胆红素、胆汁酸、钙离子、细菌性β-Gase、内源性β-Gase)，实验结束时处死动物，检测肝组织匀浆中组织源性β-Gase活性以及Ca2+-Mg2+-ATPase、Na-+-K+-ATPase的改变。4． 采用肝脏原位灌注消化法体外培养大鼠肝细胞，观察炎性细胞因子对体外培养大鼠肝细胞膜Ca2+Mg2+-ATPase、Na+-K+-ATPase活性的影响，同时观察低剂量、中剂量、高剂量清热利湿中药血清对炎性细胞因子刺激后肝细胞膜Ca2+-Mg2+-ATPase、Na+-K+-ATPase活性的调整作用。结果1． 胆汁动态研究家兔模型胆汁成分在术后3天略有变化，但与正常对照组相比无统计学差异(P>0． 05) ，术后7天逐渐降至正常。2． 胆色素钙结石成石过程中，单纯细菌感染、单纯内毒素以及单纯胆道不全梗阻状态下，均无明显结石形成。细菌感染加不全梗阻组、内毒素加不全梗阻组均可见到程度不同的色素钙结石。3． 清热利湿中药能够明显减少家兔胆汁中UCB、Ca2+含量，增加胆汁中总胆汁酸含量，并能降低胆汁中细菌性β-Gase、内源性β-Gase以及肝组 中文摘要 织源性p‘ase活性，同时可以提高肝组织细胞膜Caz+一MgZ+一TPase、 Na+一K+一TPase活性，从而阻遏了成石性胆汁的生成。 4.炎性细胞因子刺激体外培养大鼠肝细胞膜后，其caZ+一M广一ATPase、 Na+一K+峨TPase活性明显降低(P<0.05)，而清热利湿中药载药血清可 以明显提高肝细胞膜ea，‘一M犷‘一ATPase、Na‘一K‘峨Tpase活性(p<0.05)。 结论胆汁动态研究动物模型稳定可靠，可在动物本身胆汁酸池不变的情况 下，于同一个体长期动态观察胆汁成分变化。而且是在动物清醒状态 下抽取标本，从而免除了由于麻醉所致的影响因素。因此，该模型可 用于包括生理参数在内的多指标的同步观察;清热利湿中药具有很好 的降低胆汁成石性的作用。