Kv 1.1为电压门控钾通道Kv1家族的一种亚型,由KCNA1基因编码,属于延迟外向整流钾通道。Kv 1.1通道主要在神经系统表达,尤其在中枢神经系统广泛表达,该通道对控制中枢神经系统细胞的兴奋性具有非常重要的意义。研究报道表明Kv 1.1通道突变可直接或间接引发癫痫、多发性硬化症、共济失调等疾病,对该通道调制剂的研究能够很好地促进其相关疾病的治疗研究。本实验主要从我国广西特有的敬钊缨毛蛛粗毒中分离纯化并筛选得到一种Kv1.1钾通道的新型选择性抑制剂—JZTX-50,开展了该毒素的结构与功能关系研究。结合反相高效液相色谱、离子交换层析及质谱技术分离纯化得到的一种相对分子质量为3897.0的多肽毒素能够有效抑制在HEK293T细胞中表达的Kv1.1电流。经过Edman降解测定得到该多肽毒素分子的氨基酸全长序列为:GRCIEEGKWCPKKAPCCGRLECKGPSPKQKKCTRP,序列比对确定为JZTX-50,是一种新型的Kv 1.1抑制剂。该毒素共含35个氨基酸残基,有3对二硫键,推测其具有典型的ICK模体结构。利用膜片钳技术进行电生理检测发现,50 nmol/L的JZTX-50能够显著地抑制Kv1.1电流。进一步实验发现,JZTX-50对Kv1.1的抑制作用具有明显的浓度依赖性,曲线拟合分析得其半数有效抑制浓度(IC50)为38.15 nmol/L。根据稳态激活曲线,加入50 nM的多肽毒素JZTX-50不会使曲线发生很大偏移,对Kv 1.1的激活动力学特征基本没有影响。为了研究JZTX-50对Kv 1.1作用的专一性,检测了该毒素对其他钾通道亚型的作用,结果表明,JZTX-50对Kv 1.2、Kv 1.3、Kv 2.1、Kv2.2、Kv4.2、Kv4.3基本没有作用,在较高浓度下对Kv 1.4及Kv 7.1仅有微弱的抑制作用。此外,利用膜片钳技术还检测了该毒素对急性分离的大鼠背根神经节(DRG)细胞上的钠电流和钙电流的作用,结合对部分外源表达于HEK293T细胞的Nav亚型的检测发现,1μM的JZTX-50对DRG上TTX-敏感型钠电流、TTX-不敏感型钠电流、钙电流及HEK293T表达的Nav 1.4、Nav 1.5都没有或者仅有微弱的抑制作用。所有实验结果证明,JZTX-50对Kv 1.1电流抑制作用强而且选择性良好,并且不影响其激活动力学特征,具有开发成研究Kv 1.1通道工具试剂的潜在应用前景,而且可能对多发性硬化症等疾病的治疗具有一定的意义。