地黄叶醇提工艺及抗小鼠急性肾衰竭作用的研究

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以乙醇溶液为提取溶媒,以梓醇得率为评价指标,乙醇浓度、溶媒用量、提取次数、提取时间为考察因素,用正交设计方法优化得到地黄叶最佳提取工艺为:10倍量50%乙醇,提取3次,每次1.0h。以活性炭为吸附剂,对地黄叶醇提物进行纯化。通过研究活性炭用量、吸附时间、洗脱剂乙醇浓度、洗脱体积、样品浓度等因素对梓醇吸附量和梓醇回收率的影响,得到活性炭纯化工艺为:以水为溶剂将地黄叶醇提物干粉配制成10mg/ml的溶液,加入醇提物干粉46倍量的活性炭,吸附12h,然后装柱(柱高6cm,柱体积(BV)约20ml),用5BV水洗去杂质后,用3BV 30%乙醇洗脱。经活性炭纯化后,梓醇纯度由原来的6.19%提高到15.30%。对经活性炭纯化的地黄叶醇提物用大孔吸附树脂进一步纯化,研究树脂型号、上样量、上样浓度、洗脱剂乙醇浓度、洗脱体积、洗脱速度等因素对梓醇吸附量和梓醇回收率的影响,得到大孔树脂纯化工艺为:将经活性炭纯化的地黄叶醇提物配制成含梓醇约0.5mg/ml的溶液,将预处理过的H103大孔树脂湿法装柱(柱高38cm,柱体积(BV)750ml),取上述地黄叶醇提物溶液上样,上样速度为1BV/h;蒸馏水洗脱5BV后,用10%乙醇洗脱4BV,洗脱速度为3BV/h。经大孔树脂纯化后,梓醇纯度由原来的15.30%提高到46.60%。分别以马兜铃酸A和甘油诱导建立小鼠急性肾衰竭模型,研究经活性炭和大孔吸附树脂纯化的地黄叶醇提物抗小鼠急性肾衰竭作用,结果表明:地黄叶醇提物具有抗小鼠急性肾衰竭作用;梓醇是有效成分之一;除了梓醇之外,地黄叶醇提物中还有其它成分可以提高其抗小鼠急性肾衰竭作用。
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