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禽疱疹病毒感染广泛存在于多种鸟类之中,能引起鸡、鸭等禽类感染。目前,禽疱疹病毒的感染呈现多样化,不再局限于家禽体内,在鸽子体内也发现感染。自然感染野鸽临床表现为厌食、精神不振、结膜炎；剖检可见上呼吸道发炎,严重者溃疡,肝脏、脾脏、肾脏及胰脏坏死,肝脏表面可见小的坏死点；组织病理学检查显示肝细胞内可见核内包涵体,肝脏、肾脏、脾脏及胰脏大量坏死和炎症细胞浸润。鸽子是我国主要的经济动物之一,疱疹病毒对养鸽业造成较为严重的经济损失。鸽疱疹病毒(Pigeon herpesvirus, PiHV)又称哥伦比亚疱疹病I型(Columbid herpesvirus 1, CoHV-1),属于禽疱疹病毒科甲型疱疹病毒亚科马立克氏病毒属成员。该病首次爆发于1945年,目前已在世界范围内流行,成为危害养鸽业发展的主要传染病之一。2013年,康达畜禽咨询服务中心收到黑龙江省内的患病野鸽子病例。本研究通过对自然发病野鸽的流行病学调查、临床症状观察、以及病毒的分离纯化和理化特性检验、动物回归试验和基因检测分析证明该病病原为CoHV-1。这是我国首次在野鸽(Columba livia f. dom)中成功分离得到CoHV-1。UL27基因编码的gB蛋白是疱疹病毒感染过程中的主要囊膜糖蛋白。因此,研究鸽疱疹病毒UL27基因对其分子生物学功能意义重大,同时对临床上诊断、预防鸽疱疹病毒及其基因工程疫苗起着指导作用。本研究以CoHV-1-HLJ基因组为模板,设计简并引物,并结合步移PCR的技术,获得了CoHV-1-HLJ UL25、UL26、UL27基因序列,DNA序列分析得到的对应的开放阅读框(ORF)大小分别为1755bp、2328bp、2788bp；编码的氨基酸(aa)个数分别为584aa、775aa、995aa；UL27基因序列提交GenBank对应的登陆号为：KU051711。分析CoHV-1-HLJ gB蛋白抗原性,在gB蛋白胞外区抗原性较好的区域设计一对引物,克隆到表达载体pET28a(+)中,构建重组质粒pET28a-CoHV-gB,将阳性重组质粒转化到感受态BL21(DE3)中,得到大量的以包涵体形式表达的目的蛋白,SDS-PAGE可见蛋白大小约为37.5 kDa。重组蛋白能够与本实验室制备的兔抗CoHV-1-HLJ病毒粒子免疫血清发生特异性反应。综上所述,本研究为国内首次从野鸽(家养鸽子野外驯化)体内分离出一株鸽源疱疹病毒CoHV-1-HLJ, CoHV-1-HLJ感染鸽子后,临床上表现为呼吸抑制和结膜炎,解剖病理变化为肝脏、肾脏、脾脏及胰脏坏死及感染脏器内(肝脏)可见嗜酸性核内包涵体；pET28a-CoHV-gB是野鸽疱疹病毒UL27基因的主要抗原区域(231-510aa)。本实验的进行有助于了解目前中国CoHV-1-HLJ的分子流行情况,为今后CoHV-1-HLJ疫苗株的筛选及CoHV-1-HLJ的诊断防控提供了参考。