二烯丙基二硫对Raji细胞化疗增敏的研究

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目的:研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对长春新碱(VCR)作用于人淋巴瘤Raji细胞化疗增敏的作用及机制,为摸索治疗淋巴瘤合理的药物组合提供实验依据。方法:1、体外培养Raji细胞,采用CCK-8法测定DADS和VCR对Raji细胞的增殖抑制率,确定DADS的无毒剂量和VCR的IC50。2、用无毒剂量的DADS、VCR单药、无毒剂量DADS和VCR联合应用作用于Raji细胞,采用CCK-8法检测各自的抑制率,应用金氏公式求q值,评价联合用药效果,确定DADS是否有化疗增敏效应。3、采用流式细胞术检测细胞凋亡百分率的变化。4、采用细胞免疫化学法检测细胞Bcl-2及Bax的表达情况,并用病理图象分析软件进行半定量分析,以探讨DADS化疗增敏的可能机制。结果:1、VCR(6.25,12.5,25.0μg/ml)单药、无毒剂量的DADS(0.625,1.25μg/ml)单药、VCR(6.25,12.5,25.0μg/ml)和DADS(0.625,1.25μg/ml)联合应用作用于Raji细胞,联合组细胞生长抑制率均明显高于相应VCR单药组(P<0.05),q>1.15,DADS具有增敏作用。2、VCR(6.25,12.5,25.0μg/ml)、无毒剂量的DADS (0.625μg/ml)、VCR(6.25, 12.5,25.0μg/ml)和DADS (0.625μg/ml)联合作用细胞24 h后,VCR可诱导Raji细胞凋亡,而联合用药时细胞的凋亡率均明显高于相应VCR单药组(P<0.05)。3、VCR (6.25,12.5,25.0μg/ml)与细胞作用后可下调Bcl-2的表达、上调Bax;而VCR(6.25,12.5,25.0μg/ml)与无毒剂量的DADS(0.625μg/ml)合用时细胞Bcl-2的表达率明显低于相应VCR单药组(P<0.05)、Bax的表达率明显高于相应VCR单药组(P<0.05),Bax/Bcl-2比值升高(P<0.05)。结论:1、无毒剂量的DADS能增强VCR对Raji细胞增殖抑制,起化疗增敏作用。2、DADS的化疗增敏作用可能与诱导Raji细胞凋亡有关。3、DADS化疗增敏作用机制与其下调Raji细胞Bcl-2蛋白表达水平,上调Bax蛋白表达水平有关。
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