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连钱草[Glechoma longituba(Nakai)Kupr.]为唇形科活血丹属草本植物,具有溶石、抗菌、消炎等作用。本文对连钱草多糖进行研究,优化了连钱草多糖的脱蛋白脱色素工艺,分离纯化出分子量均一分布的多糖并对其理化性质、结构组成及生物活性进行了研究,为连钱草多糖的功能性开发奠定了基础。1.通过水提醇沉法获取连钱草粗多糖(GP),以多糖保留率、蛋白质清除率和脱色率为指标,在单因素试验的基础上采用正交试验分别考察了活性炭、大孔树脂D301G对GP溶液的脱蛋白脱色素效果,确定最优脱蛋白脱色素工艺。结果表明,活性炭对GP的最佳脱蛋白脱色素条件为:活性炭添加量1.0%(g/mL),振荡时间1.5 h,多糖浓度6 mg/mL,样液pH 3.0,此条件下多糖保留率、蛋白质清除率、脱色率分别为(95.32±1.66)%、(94.59±0.34)%、(86.49±0.81)%;D301G对GP溶液的最佳脱蛋白脱色素条件为:大孔树脂添加量15%(g/mL),振荡时间0.5 h,多糖浓度2 mg/mL,样液pH 7.0,此条件下多糖保留率、蛋白质清除率、脱色率分别为(93.41±0.87)%、(95.82±0.19)%、(96.97±0.05)%;综合比较,D301G对GP的脱蛋白脱色素效果优于活性炭。脱蛋白脱色素后的粗多糖GPC依次经DEAE Sephadex A-25离子交换层析和Sephacryl S-200凝胶过滤层析,得到三个组分:GRa-1、GRb-1、GRb-2。2.考察了GRa-1、GRb-1、GRb-2的理化性质和纯度,并分析了GRa-1的单糖组成及结构特点。结果表明,GRa-1、GRb-1为中性多糖,GRb-2为碱性多糖,三者均不含蛋白质;HPLC分析显示GRa-1为分子量均一分布的多糖,相对分子质量为3 584 Da,而GRb-1和GRb-2则含多种多糖组分,有待进一步纯化;GRa-1的红外图谱显示该多糖含有D型甘露呋喃糖;GC-MS分析GRa-1的单糖组成为阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖四种,摩尔比为0.005:0.014:0.168:0.813。3.研究连钱草多糖分离纯化中各组分的体外抗氧化活性和分布。结果表明,粗多糖GP和GPC在各方面都显示出较强的体外抗氧化活性;GRa-1在Fe2+螯合及O-2·、OH·、DPPH+·清除上表现出较强的活性;GRb-1对O-2·和OH·表现出较强的清除能力;GRb-2除Fe2+螯合和O-2·、OH·、DPPH+·清除力较强外还具有强的总还原力。4.通过腹腔注射葡萄糖耐量试验(Intraperitoneal Glucose Tolerance Test,IPGTT)、口服脂肪耐量试验(Oral Fat Tolerance Test,OFTT)、二甲苯致小鼠耳肿胀试验、老年小鼠抗氧化试验,检测了GRa-1的降血糖、降血脂、抗炎和体内抗氧化活性,结果表明,GRa-1能显著提高小鼠对葡萄糖的利用能力;加速小鼠体内甘油三酯的代谢;显著抑制二甲苯致小鼠耳肿胀;增强老年小鼠血清和肝脏中部分抗氧化酶活性,降低脂质过氧化产物(MDA)含量。