亲和色谱是一种高效简便的蛋白质纯化分离技术,对多种蛋白质都有很好纯化分离效果。亲和吸附剂由载体基质与亲和配体偶联而成,影响其分离效果的关键因素是亲和配基。染料亲和色谱则是亲和色谱中用与蛋白分离最重要的色谱之一。仿生染料配基易于合成,化学物理性能稳定,不易被生物降解,已成功的用于分离纯化大部分的蛋白质和酶,是目前使用最广泛的一类染料配基。利用生物信息技术设计合成出性能更好的染料分子,以弥补现有染料配基特异选择性不高的缺陷是一项有意义的工作。本文以合成的端基为偶氮基的三嗪染料作为亲和配基,壳聚糖多孔微球作为一种亲和基质,制备了一种新型的仿生染料配基亲和吸附剂并考察了其对蛋白质的吸附情况,主要做了以下研究工作: 1、以Procion Blue MX-R为原料,以类甲基橙为端基,以亲电取代反应合成了一种三嗪染料,命名为活性偶氮绿(简称RAG),并对其结构进行表征。 2、以环氧氯丙烷为交联剂,采用反相乳化交联法,在乙酸溶液浓度为2%,油水比为1:1,致孔剂浓度为0.5%,环氧氯丙烷浓度为0.04 mol/L的条件下制备了粒径在40μm左右的壳聚糖多孔微球(CS)。该壳聚糖多孔微球对蛋白的非特异性吸附较小。 3、以壳聚糖微球为基质,采用直接偶联法偶联Procion Blue MX-R、CibacronBlue F3GA和自制染料活性偶氮绿(RAG),制得了三种染料吸附剂CS-PB、CS-CB和CS-RAG,测定了其物理性能,并研究了配基密度的控制以及染料泄