喷砂复合微弧氧化处理纯钛表面后对成骨细胞活性的影响

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目的:研究喷砂复合微弧氧化处理纯钛表面后成骨细胞的附着,增殖及活性,经过与两个对照组比较提供相应的实验依据;从而探讨喷砂复合微弧氧化处理技术在钛种植体表面改性中的应用价值和可能性。  方法:首先将实验分为三组:A组为空白对照组、B组为喷砂酸蚀(SLA)组、C组为喷砂复合微弧氧化组,每组钛片的例数是35片;然后通过体外培养SD乳鼠的成骨细胞,取第四代成骨细胞接种于处理好的3组钛片上,培养到测定的时间点;在细胞对数生长期每组取1块钛片,采用扫描电镜观察成骨细胞在钛片表面生长的情况并拍片记录。苏木精—伊红染色法(HE染色)观察成骨细胞形态。碱性磷酸酶染色和茜素红矿化结节细胞学染色的方法鉴定成骨细胞。用血球计数板记录每组钛片表面在1d、2d、3d、6d、7d、8d的细胞数,观察细胞的生长曲线。通过用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT比色法)测定不同时间点各组细胞的毒性与存活、增殖情况。用碱性磷酸酶(ALP)ELISA检测试剂盒检测细胞的活性。数据采用SPSS11.5进行方差分析。  结果:MTT法细胞毒性与存活、增殖的测试中,培养1d、2d中测得的各组成骨细胞没有明显的统计学意义(P>0.05);培养3d后细胞增殖率具有统计学意义(P<0.05),喷砂复合微弧氧化组>喷砂酸蚀(SLA)组>空白对照组。ALP活性检测中,3d、6d两个检测时间点上,各组ALP活性都具有统计学意义(P<0.05),第6d的活性比3d前有明显增高,喷砂复合微弧氧化组>喷砂酸蚀(SLA)组>空白对照组。成骨细胞在各组钛片上有较好的附着,1-3d细胞处于潜伏期,细胞数量变化不大,3-6天细胞开始分裂,处于对数生长期,细胞数量明显上升,6-8d细胞处于停滞期,细胞数量减少;细胞计数均有统计学意义(P<0.05),细胞数量按数量多少依次为:喷砂复合微弧氧化组>喷砂酸蚀(SLA)组>纯钛对照组。  结论:3组钛片上成骨细胞附着,增殖及活性的比较结果为喷砂复合微弧氧化组优于其他两组,喷砂复合微弧氧化处理方法,不仅获得良好的表面微型结构,提高粗糙度,能够形成一层生物活性膜从而促进成骨细胞的粘附,因而喷砂复合微弧氧化处理方法比传统的表面改性处理方法更有优势。
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