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梯恩梯(TNT,2,4,6-三硝基甲苯)是一种常见的爆炸物,具有威力大、稳定性强等特点,常出现在各种类型的爆炸袭击案件中。此外,TNT具有一定的毒性,可经消化道、呼吸道及皮肤侵入人体引起慢性中毒。因此,近年来TNT检测方法的研究一直受到广泛关注。本文将新兴的生物适配体技术与纳米技术相结合,建立了两种基于纳米金粒子为功能元件的适配体传感器方法以对溶液中的TNT进行定量检测。主要研究内容包括以下三部分:1、研究了作为传感器重要元件的TNT适配体-纳米金粒子复合物的合成方法及稳定性。实验制备了三种不同粒径的纳米金粒子,通过Au-S键自组装法将TNT肽适配体修饰在纳米金粒子表面,合成TNT适配体-纳米金粒子复合物。通过表征发现三种纳米金粒子形貌均匀、呈稳定分散态;5 nm纳米金粒子与适配体制成复合物时出现轻微团聚,其它两种粒径(15 nm、25 nm)纳米金粒子在与适配体结合后,复合物的分散性和稳定性均有提高。实验还研究了不同条件对复合物稳定性的影响,结果表明适配体浓度在10-5 g/mL以下,溶液pH值大于8,盐浓度小于4 mmol/L时复合物保持稳定的分散状态。2、构建了纳米金粒子功能化的比色法适配体传感器用于TNT的检测。TNT适配体-纳米金粒子复合物在一定盐浓度溶液中稳定存在,当加入目标物TNT后,由于TNT适配体与TNT的特异性结合作用,改变了适配体的空间三维结构,从而破坏了复合物溶液的稳定性产生团聚现象,溶液由酒红色变为紫黑色。实验过程通过紫外-可见光分光光度仪进行表征,优化了溶液盐浓度、pH值及TNT孵育时间等条件,依据吸光度A650/A523比值对TNT进行定量分析,线性范围350~650 ng/mL,检出限330 ng/mL。该方法具有操作简便、成本低、可从外观颜色进行判断等优点,具有良好的应用前景。3、构建了纳米金粒子功能化的表面等离子体共振(SPR)适配体传感器用于检测TNT。该传感器主要依靠TNT适配体-纳米金粒子复合物与传感器芯片表面修饰物的相互作用,通过间接竞争法对TNT进行检测。实验考察了不同粒径纳米金粒子对SPR信号的影响,优化了溶液pH值、进样时间、进样流速以及孵育时间等实验条件。在最优条件下,传感器检测TNT的线性范围为500 pg/mL~10 ng/mL,检出限为58 pg/mL。该传感器具有灵敏度高、特异性好、可对TNT进行痕量检测等优点。此外,SPR检测系统可小型化,能够实现实时快速检测。