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衰老作为植物生长发育的最后阶段,为人类生产活动带来了不利。而光敏色素相互作用因子(PIFs)作为一种转录因子在植物生长发育过程中发挥重要作用,它能调节拟南芥种子的萌发、下胚轴的伸长、叶绿素合成等生理过程,但PIFs与植物衰老之间的关系仍不清楚。细胞分裂素作为一种植物激素可以调节植物细胞分裂与新陈代谢,还与延缓叶片衰老有关。另外,一氧化氮(NO)是生物体内普遍存在的信使和效应分子,已有研究发现NO在延缓植物衰老过程中发挥重要作用。延缓衰老能增加农作物产量并能改良农作物品质。本文以拟南芥为材料,研究了PIF5在暗处理引起的衰老过程中的作用,以及添加细胞分裂素(6-BA)和NO对于PIF5调节暗诱导衰老的影响。研究结果表明:(1)暗诱导衰老过程中,PIF5缺失突变体pif5-2中叶绿素含量高于Col-0,而PIF5超表达体PIF50X中叶绿素含量低于Col-0,并且在暗处理条件下,pif5-2比Co1-0抗衰老能力强,而PIF50X却比Col-0的抗衰老能力弱。衰老Market基因SAGl2表达量在pif5-2中明显低于Col-0及PIF5OX,而叶绿素降解基因SGR、 NYC.1表达量在PIF5OX最高,Col-0次之,pif5-2最低。说明在暗诱导衰老过程,PIF5起正调节作用。(2)在暗处理条件下添加6-BA时,Col-0、PIF5OX、pif5-2中叶绿素含量相比于对照(未添加6-BA)得到了回复,伤害程度也得到缓解;SAG12、SGR、NYC-1基因的表达量都比对照低,并且PIF5O冲下调的最明显,pif5-2只是略微下调。说明6-BA对SAG12、SGR、NYC-1三个基因的调节依赖于PIF5因子。(3)添加不同浓度硝普钠(SNP,NO供体)时,50μM SNP能缓解暗处理下Col-0、 PIF5OX、pif-2三种株系中叶绿素的降解,提高了拟南芥的抗逆性,同时AG12、 SGR、NYC1的表达量也降低。但是200μM SNP处理下,三种株系中叶绿素含量相比对照低,且伤害程度加大,表现为MDA和H2O2含量、离子渗漏程度提高,加速了拟南芥衰老。说明NO在暗诱导衰老过程中有浓度效应:低浓度的NO作为信号分子,可以缓解PIF5调节的暗诱导衰老;而高浓度NO在促进植物体内形成更多02-,对于PIF5调节的暗诱导的衰老有促进作用。(4)对PIF5基因表达量检测发现,添加6-BA和50μM SNP后,PIF5的表达量明显下调,进一步解释了外源6-BA和SNP缓解叶片衰老的原因。但是PIF5基因表达降低的机理还需进一步的探究。