TRAIL、Caspase-3在尖锐湿疣组织中的表达及意义

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尖锐湿疣(condylomata acuminatum, CA)是由人类乳头瘤病毒(human papilloma virus, HPV)感染引起的生殖器、肛周增生性(亚临床感染除外)损害,是一种常见的性传播疾病(sexually transmitted diseases, STD).自从20世纪70年代,CA的发病率在世界范围内呈增高态势,已成为全球关注的公共卫生问题之一。近年来,我国CA患者的发病率也有逐年增高的趋势,目前居我国STD的第二位。本病具有生长快、传染性强、治疗后易复发的特点,且部分病例尚有恶变的可能,对患者的健康影响很大,逐渐受到人们的关注。人类是HPV唯一的自然宿主,人类的皮肤、粘膜和化生的三种鳞状上皮细胞均对HPV敏感,HPV通过受损的鳞状上皮细胞而使其感染。有研究表明,人体鳞状上皮细胞感染HPV后,存在细胞的异常增值及凋亡异常。目前,HPV感染人体导致CA异常增生的具体机制尚未完全明了,可能是由于人体感染HPV病毒后,发生了细胞分裂增加或者细胞死亡减少。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumornecrosisfactor related apoptosis inducing ligand, TRAIL)主要引起肿瘤细胞、病毒感染细胞、转化细胞的凋亡;半胱氨酸蛋白酶-3(cysteine aspartate-specific protein-ase-3, Caspase-3)又称为死亡蛋白酶,处于凋亡途径的核心环节,参与了多种因素诱导的细胞凋亡。近年来,对二者的研究主要集中在肿瘤方面,而在CA中的研究较少。本研究应用免疫组化SP法分别检测TRAIL和Caspase-3在CA组织和正常包皮组织中的表达,并分析CA组织中TRAIL和Caspase-3表达的相关性及其意义,旨在探讨TRAIL、Caspase-3在CA发病中作用。材料和方法1材料30例CA患者样本均来源于我院皮肤性病科门诊,其中男18例,女12例,年龄16-50(30.32±7.18)岁;病程20-90(54.6±12.63)天,它们均具有典型的临床表现,明确的病理诊断,符合CA的诊断标准,并且取材前均未接受任何治疗。以20例泌尿外科行手术切除的正常男性包皮作为对照组。2方法及结果判定本实验采用免疫组化SP法,分别检测TRAIL和Caspase-3在30例CA患者组织中和20例正常人包皮组织中的表达,具体步骤按照试剂盒上的说明进行。TRAIL阳性显色为胞浆或胞膜出现淡黄色至棕黄色颗粒状沉着物,阳性细胞主要分布在棘细胞层;Caspase-3阳性显色为胞浆内出现淡黄色至棕黄色颗粒状沉着物,阳性细胞多片状或弥漫状分布于棘层的中上部和颗粒层。根据阳性细胞所占的百分比和着色强度进行评分。阳性细胞所占的百分比≤10%为0分,11%-25%为1分,26%~50%为2分,51%-75%为3分,≥76%为4分。按照视野的着色强度评分:无着色为0分;着淡黄色为1分,着棕黄色为2分,着棕褐色为3分。然后以这两项分值的乘积作为评定的最后得分:9-12分为强阳性(+++),6-8分为阳性(++),1-4分为弱阳性(+),0分为阴性。3统计学处理所有数据均采用SPSS17.0统计软件进行分析,TRAIL和Caspase-3在两组间阳性表达率的差异应用卡方检验,两组间蛋白表达水平的差异应用秩和检验,比较CA组织中两种蛋白表达率的相关性应用Spearman关联性分析,检验水准α=0.05.结果1CA组织中和正常包皮组织中TRAIL蛋白的表达30例CA组织中22例TRAIL阳性表达,阳性表达率为73.3%(22/30),表达强度多在++-+++;20例正常包皮组织中有4例TRAIL阳性表达,阳性表达率为20%(4/20),表达强度多在+~++。两组阳性表达率差异有统计学意义(x2=13.675,P<0.05),两组阳性表达强度差异有统计学意义(H=14.319,P<0.05)。2CA组织中和正常包皮组织中Caspase-3蛋白的表达30例CA组织中18例Caspase-3蛋白阳性表达,阳性表达率60%(18/30),其表达强度多在-~++;20例正常包皮组织中13例阳性表达,阳性表达率为65%(13/20),表达强度多在+~++,两组阳性表达率差异无统计学意义(x2=0.127,P=0.721,P>0.05),但两组阳性表达强度差异有统计学意义(H=5.767,P=0.016,P<0.05)。3CA组织中TRAIL和Caspase-3表达的相关性分析在30例尖锐湿疣组织中,TRAIL表达阳性的有22例,阴性有8例;另外,有18例Caspase-3表达阳性,12例表达阴性。经Spearman相关分析后发现,30例CA组织中TRAIL与Caspase-3表达呈现正相关性(r=0.585,P=0.001,P<0.05)。结论1.CA组织中存在TRAIL蛋白过表达,可能影响细胞的凋亡,参与CA的发生、发展。2.CA组织中Caspase-3蛋白的异常表达,可能参与了CA的发病。3.CA组织中TRAIL与Caspase-3的表达呈正相关,二者可能共同参与CA的发生、发展。
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