微生物传感细胞构建及环境介质遗传毒性表征研究

来源 :清华大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wllzjw
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
人类生产活动使得具有“三致”效应化学组分进入环境介质,具有潜在的遗传毒性风险。微生物传感细胞是一种新兴的生物学遗传毒性检测技术,与传统方法相比具有灵敏度高、响应时间快、检出限低等优点,可定性及定量地进行污染物遗传毒性检测,为环境介质遗传毒性的快速筛选和风险评估提供了可行性。为了快速表征污染地下水、土壤、地表水等环境介质的遗传毒性水平,本文构建了基于大肠杆菌E.coli的遗传毒性传感细胞DH5α_V_recA_lux,其启动基因recA的来源是Vibrio Natriegens,报道基因为luxCDABE。DH5α_V_recA_lux在温度15°C-42°C,盐度0%-3%,pH范围4.0-9.0的环境条件下均可以对环境介质遗传毒性进行表征。对于不同环境介质,DH5α_V_recA_lux均可定量表征其遗传毒性。基于构建的不动杆菌ADP1微生物传感细胞,研究了DNA损伤响应机制,结果表明在启动DNA损伤响应过程时,ADP1首先启动剪切修复基因,而后重组修复基因。通过ADP1毒性表征工作机理概念模型的完善,分析了ADP1传感细胞的毒性表征机理,解析了其毒性表征过程。对于不同类型碳源对ADP1_recA遗传毒性表征的影响,研究表明碳源主要影响转录水平和翻译水平,且与毒性机制有关。转录水平上,不同碳源中recA基因表达量存在差异;翻译水平上,简单碳源中有122种蛋白相对于复杂碳源LB有显著变化,64种蛋白表达水平上升,58种下降,其中热激蛋白90、RNA聚合酶、磷酸盐缺乏应激蛋白(PhoH-like)、DNA/RNA非特异性内切酶G蛋白、双组分调节系统响应调节子与DNA损伤响应过程相关。所构建的传感细胞用于不同环境介质样品遗传毒性表征的研究表明,传感细胞对石化污染地下水的挥发性有机物(VOCs)和多环芳烃(PAHs)的检出限分别为0.8μg/L和12.9 ng/L;对原油污染海水的检出限为ppm数量级;对于污染土壤采用300 s超声萃取方法,可以实现遗传毒性的直接表征。通过磁性纳米材料处理传感细胞,能够避免复杂环境介质对于遗传毒性表征的干扰,提高了传感细胞对复杂污染介质毒性表征的能力。通过采用不同浓度的琼脂对传感细胞进行固定化处理,有利于传感细胞的保存和携带,为传感细胞应用于环境介质遗传毒性的在线表征奠定基础。
其他文献
探讨体育锻炼对老年人的心理健康水平和主观幸福感的影响。将72名老年人分为两组(体育人口组和非体育人口组),进行SCL-90问卷和主观幸福感问卷调查。结果表明,体育人口组老年
茶叶包装已成为产品销售中的一个重要环节,其不仅关乎消费者的视觉审美体验,而且更涉及刺激大众的消费心理需求。本文选取茶叶包装设计作为研究对象,以安吉白茶为典型案例,从
目的:观察头穴透刺对急性脑梗死患者血清TNF-α、IL-6、SOD、MDA水平的影响,探讨其作用机制。方法:采用随机数字表法分为透穴治疗组40例、普通针刺组40例、药物对照组40例,分组
分析对比了从EAF粉尘中回收氧化锌的威尔兹法和添加石灰的新型工艺,并建立了石灰添加工艺的基本原理,同时在研究中发现了新工艺较之传统工艺的许多优势。 Analysis and comp
本文分析了上海义务教育均衡发展的成就和需要突破的问题,提出上海要追求义务教育高位均衡发展,并就高位均衡的内涵和特征进行了说明。本文认为,上海推进义务教育高位均衡发
大坝安全监测是通过仪器观测和巡视检查对水利水电工程主体结构、地基基础、两岸边坡、相关设施以及周围环境所作的测量及观察;“监测”既包括对建筑物固定测点按一定频次进行
期刊
5G车联网的快速发展,为交通流参数的获取提供新机遇和条件。文中研究了5G车联网环境下9个交通参数的提取方法,搭建基于VISSIM交通仿真的车联网仿真平台,选取典型路段和交叉口
《大学》位列《四书之首》,是中国古代非常重要的教育典籍。《大学》有言:"‘如切如磋’者,道学也。‘如琢如磨’者,自修也。"在这里,《大学》运用了类比法,点出了中国古典教
“优质”与“公平”是义务教育高位均衡发展的关键。文章解读了义务教育“高位均衡”发展的内涵、现状与问题,并提出了相关建议:以“包容性”增长推进义务教育“优质”均衡发展
近年来,为适应智能电网建设的发展方向,满足电网调度一体化建设和运行的要求,提高电网调度的信息化、自动化、互动化水平,智能远动概念随之出现。介绍智能远动技术基本概念和