本研究拟从监测鼻咽癌患者治疗前后血清中。TGF-β1的表达水平入手，分析TGF-β1与鼻咽癌患者临床特征及预后的关系；再进一步检测TGF-β1及其信号传导通路中各关键分子，包括TGF-β1及其两个受体TβRI、TβR Ⅱ和此信号通路下游关键分子Smad4，在鼻咽癌病理组织中的表达情况，进一步分析鼻咽癌病理组织中TGF-β1及其信号传导通路中各关键分子与鼻咽癌患者临床特征及预后的关系；然后在鼻咽癌细胞株中通过检测，筛选出能完全表达TGF-β1及其信号传导通路中各关键分子的鼻咽癌细胞株，为进一步的体外研究寻找合适的研究对象；最后利用外源性TGF-β1作用于已经筛选出的鼻咽癌细胞株，观察TGF-β/Smad信号通路对鼻咽癌生长、分化及凋亡等方面的影响，从而明确TGF-β/Smad信号通路对鼻咽癌发生、发展的作用机制。本研究预期为鼻咽癌患者制定合理的分层治疗方案提供可靠的理论依据，并为以基因为靶点的治疗手段的研究提供新的策略和途径。 第一部分　鼻咽癌患者血清中TGF-β1的检测及其临床意义 目的： 检测TGF-β1在鼻咽癌患者血清中的表达水平，进一步分析它与鼻咽癌患者临床特征及预后的关系。 方法： 采用ELISA实验方法检测156例鼻咽癌患者血清中的TGF-β1表达水平，应用SPSS13.0软件包进行统计学分析。 结论： 鼻咽癌患者治疗前血清中的TGF-β1浓度明显高于正常人，而且患者治疗前血清中TGF-β1浓度明显高于治疗后，治疗前血清中TGF-β1浓度与颈淋巴结N分期、92’临床分期和治疗后有无远处转移相关性具有显著的统计学意义，TGF-β1高浓度组3年总生存率、3年无进展生存率、3年无复发生存率及3年无转移生存率均较低浓度组差，高浓度TGF-β1是鼻咽癌患者总生存率、无进展生存率及无转移生存率的不良预后因素，说明血清中TGF-β1浓度可能成为诊断和预测鼻咽癌预后的分子指标。 第二部分　TGF-β1及其信号通路分子在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义 　　目的： 检测TGF-β1及其信号通路关键分子(TβR Ⅰ、TβR Ⅱ和Smad4)在鼻咽癌组织中的表达水平，探讨其与鼻咽癌临床特征及预后的关系。 方法： 采用免疫组化方法检测91例鼻咽癌患者TGF—β1及其两个受体TβR Ⅰ、TβR Ⅱ和此信号通路下游分子Smad4在组织中的表达情况，分析它们与鼻咽癌患者临床特征及预后的关系。 结论： 在鼻咽癌组织中，TGF-β1表达阳性患者较阴性患者5年总生存率、5年无进展生存率、5年无复发生存率及5年无转移生存率均明显下降，说明TGF-β1阳性表达者易发生局部复发和转移，并导致生存率明显降低，表明TGF-β1对鼻咽癌患者的预后发挥着重要的调控作用，可能是通过TGF-β1对肿瘤的抑制作用减弱或者其肿瘤促进作用的增强。多因素Cox回归模型判断预后因素，结果显示TGF-β1可能是无复发生存的独立预后因素。 第三部分　外源性TGF-β1调控鼻咽癌细胞株生长、分化及凋亡的实验研究 　　目的： 筛选可以应用于体外研究的完全表达TGF-β1信号通路的鼻咽癌细胞株、观察外源性TGF-β1对此细胞株生长、分化及凋亡等的影响情况，初步分析得出TGF-β1对鼻咽癌的体外作用机制，为进一步研究其体内作用机制提供可以参考的依据。 方法： 以鼻咽高分化鳞癌CNE-1和鼻咽低分化鳞癌CNE-2细胞株为研究对象，采用免疫组化技术对鼻咽癌细胞株进行染色，筛选出可以应用于体外研究的完全表达TGF-β1信号通路的鼻咽癌细胞株为进一步研究对象。用MTT法检测外源性TGF-β1对细胞生长的影响情况，用流式细胞仪检测外源性TGF-β1对鼻咽低分化癌CNE-2细胞株细胞周期和凋亡的影响，用荧光显微镜检测外源性TGF-β1诱导鼻咽低分化癌CNE-2细胞株凋亡的情况。 结论： 鼻咽低分化癌CNE-2细胞株存在TGF-β1自分泌现象，且TGF-β1信号传导通路中各关键分子在CNE-2细胞株中均有表达，这说明可以应用鼻咽低分化癌CNE-2细胞株进行该信号通路的体外实验研究。应用外源性TGF-β1可以抑制CNE-2细胞株的生长并诱导其发生凋亡，且这种作用具有时间依赖效应，并且使细胞周期阻滞在G1期。这些结果说明TGF-β1/Smad信号传导通路可以通过调控鼻咽癌细胞的生长、细胞周期和凋亡等活动，从而参与鼻咽癌的发生和发展。