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合欢皮为豆科植物合欢Albizzia julibrissin Durazz.的树皮。《中国药典》记载合欢皮具有解郁安神、活血消肿的功效,用于心神不安,忧郁失眠,肺痈疮肿,跌扑伤痛等症。文献报道合欢皮中一系列结构近似的木脂素苷类化合物可能是其潜在的活性成分之一,因此着重对该类化合物进行追踪分离。采用巴豆油引起小鼠耳肿胀模型对提取部位的抗炎活性进行了评价。从合欢皮中共分离鉴定了木脂素苷类、酚类、生物碱类、三萜类、甾体类及其它等六类13个化合物,其中1个新化合物,3个化合物从该植物中首次分到。确立了合欢皮中木脂素苷类化合物的分离策略,为今后的研究打下基础。 将合欢皮80%乙醇浸膏用不同极性的溶剂分成了四个部位:氯仿部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位。正丁醇部位经HP-20大孔树脂柱粗分离,将木脂素苷与该部位的主要成分三萜皂苷分开,成功富集了合欢皮中含量低的木脂素苷类化合物,并利用LC-MS对该部位成分进行了快速分析。在分离过程中总结出大孔树脂划段、硅胶柱粗分、反相C18柱细分、LH-20凝胶柱或制备薄层层析精制的对极性部位进行分离的策略。对含量较大的氯仿部位也进行了初步分离。单体化合物应用ESI-MS/MS,EI-MS,HREI-MS,NMR,IR及适当的化学方法进行结构解析和鉴定。从正丁醇部位分得(-)-丁香树脂酚-4,4′-双-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅰ)、淫羊藿次苷E5(Ⅱ)、5,5′-dimethoxy-7-oxolariciresinol-4′-O-β-D-apiofuranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside(Ⅲ)、vomifoliol-3′-O-β-D-apiofuranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside(Ⅳ),3,4,5-trimethoxyphenol-1-O-β-D-apiofuranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside(Ⅴ)、glaberide I 4-O-β-D-apiofuranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside(Ⅵ)和合欢素A(Ⅶ);从氯仿部位分得正二十八烷醇(Ⅷ)、羽扇豆-20(29)-烯-3-酮(Ⅸ)、羽扇豆醇(Ⅹ)、α-菠甾醇(Ⅺ)、α-菠甾酮(Ⅻ)和β-谷甾醇(ⅩⅢ)。其中Ⅶ为新化合物,Ⅷ、Ⅸ及Ⅹ是首次从该植物中分得。 20世纪90年代大气压化学电离(APCI)的出现,使高效液相色谱与质谱联用(LC-MS)技术日益成为一种成熟的分析手段,并在药物化学中得到广泛应用。本课题灵活应用LC-MS和MS/MS辅助植化分离和鉴定,特别利用含氧苷键的糖苷类化合物的ESI-MS/MS裂解特征,获取重要的分子量及碎片信息,快速表征已知和未知化合物,解析化合物结构。 采用巴豆油致小鼠耳肿胀模型对各提取分离部位的抗炎活性进行评价,结果表明:合欢皮主要的抗炎活性成分集中在正丁醇部位;将正丁醇部位经HP-20大孔树脂柱粗分离,得到以木脂素苷为主的部位AJ-B-1和以三萜皂苷为主的部位AJ一B一2,这两部位均具有显著的抗炎活性,作用与阳性对照药雷公藤多营相当;部位AJ一B一1在给药剂量5一20mgkg一‘时,表现出一定的量效关系。