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目的:探索骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植联合鞘内注射血管内皮生长因子(VEGF)对SD大鼠急性脊髓损伤(SCI)后神经细胞凋亡和神经功能恢复的影响。方法:通过密度梯度离心的方法制备大鼠BMSCs。采用雄性Sprapue-dawley(SD)大鼠140只,重量200~250g。利用动脉瘤夹钳夹大鼠胸10脊髓建立SD大鼠T10脊髓损伤模型。随机分成手术对照组(A组),BMSCs移植组(B组),VEGF组(C组),BMSCs移植联合VEGF组(D组),每组35只。从每组中随机取5只,在术前1d,术后1d、3d、7d、14d、21d、28d进行BBB运动功能的双盲评分检测,然后取出伤段脊髓组织,通过免疫组织化学染色的方法检测神经中丝蛋白NF200的变化。每组动物再按照观察时间点随机分成术后4h组、8h组、1d组、3d组、7d组、14d组,每个时间点5只,在每个时间点取出伤段脊髓组织,用RT-PCR法检测bax和bcl-2基因表达的情况。然后把所获取的数据资料通过组内方差分析和组间均数LSD-t检验的方法进行统计学分析。结果:(1)、采用密度梯度离心的方法成功提取了BMSCs,它可以在体外进行传代、培养、扩增,经流式细胞仪检测后确定所培养的细胞为BMSCs。(2)、制作SD大鼠SCI模型后1d,所有大鼠出现双侧后肢运动功能障碍,BBB评分均小于1分,各组间无统计学差异;术后3d、1w等时间点各组大鼠间BBB评分无明显统计学差异(p>0.05);在术后2w、3w、4w的各时间点,B、C、D组的BBB评分要明显高于A组,有显著统计学差异(P<0.05),D组的BBB评分要比B、C组高,具有明显统计学意义(P<0.05);B、C两组之间BBB评分无明显统计学差异(p>0.05)。(3)、脊髓损伤后,各组大鼠bax和bcl-2基因的转录表达均上升,但基因bax表达量更高;相比于A组,B组、C组的bcl-2基因表达量更高(P<0.05),bax基因表达量更低(P<0.05);B组、C组与D组相比,bcl-2基因表达量降低(P<0.05),而bax基因表达量升高(P<0.05)。(4)、NF免疫组织化学染色结果表明,D组平均灰度值明显低于A、B、C三组,具有显著统计学差异(P<0.05)。结论:(1)BMSCs和VEGF能够促进脊髓损伤后NF的表达,加快神经功能恢复;(2)BMSCs、VEGF对凋亡基因bax、bcl-2的表达具有调节作用,从而减少神经细胞凋亡,促进脊髓功能恢复;(3)BMSCs移植联合应用VEGF对抑制神经细胞凋亡,保护脊髓,促进神经功能恢复具有协同作用。