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目的:在mRNA表达水平、蛋白水平和活性水平研究地非三唑对大鼠CYP1As酶和UGT1As酶的诱导作用,以及一些可能的诱导机制。方法:考察地非三唑对于大鼠肝脏CYP1A1/1A2的诱导作用。采用地非三唑腹腔注射方式诱导SD大鼠,同时设立空白油溶液注射组作为阴性对照组,β-萘黄酮诱导组作为阳性对照组。采用Trizol法提取大鼠肝脏RNA,用RT-PCR测定经地非三唑处理一、二及四天的鼠肝中CYP1A1、CYP1A2 mRNA的表达水平。并用Western-blot测定诱导后大鼠肝中CYP1A2蛋白表达水平。同时选用CYP1A1/2的特征底物乙氧基异吩恶唑和非那西丁作为体外探针底物,检测地非三唑诱导后大鼠肝微粒体中CYP1A1/2的活性变化。特征底物乙氧基异吩恶唑和非那西丁分别与鼠肝微粒体共孵育,用荧光法和HPLC法分别测定代谢产物异吩恶唑的生成量和非那西丁的剩余量,以表征微粒体中CYP1A1和1A2活性。考察地非三唑对于大鼠肝脏和小肠部位UGT1As的诱导作用。采用Trizol法提取大鼠肝脏总RNA,用RT-PCR测定经地非三唑处理二天及四天的鼠肝中UGT1A1、UGT1A3、UGT1A6及UGT1A9 mRNA的表达水平。同时选用4-硝基酚和异丙酚作为体外探针底物检测地非三唑诱导后大鼠肝微粒体和小肠微粒体中UGT1A6及UGT1A9的活性变化。特征底物4-硝基酚和异丙酚分别与鼠肝微粒体和小肠微粒体共孵育,用HPLC法分别测定4-硝基酚和异丙酚的剩余量,以表征微粒体中UGT1A6及UGT1A9活性。结果:地非三唑对于大鼠肝脏CYP1A1/2的诱导作用:经地非三唑处理一、二及四天的鼠肝细胞中CYP1A1、CYP1A2 mRNA的表达水平比空白组有明显的增加,对照组的CYP1A1灰度比值为0.2704±0.040,诱导1、2、4天的灰度比值分别为0.343±0.055、0.417±0.045、0.603±0.083;对照组的CYP1A2灰度比值为0.613±0.189,而诱导1、2、4天的灰度比值分别为1.510±0.226、3.057±0.518、4.120±0.458。并且随着诱导天数的增加,CYP1A1、CYP1A2 mRNA的表达也逐步增加,诱导天数与表达水平之间存在一定的线性关系(相关系数分别为0.9984及0.9563)。乙氧基异吩恶唑-脱乙基酶(EROD)活性及非那西丁的代谢活性明显强于空白组,而且两者均与诱导天数存在一定的相关性。比较mRNA表达水平、蛋白水平和活性水平,地非三唑诱导4天组均和阳性对照组相当。地非三唑对于大鼠肝脏和小肠部位UGT1As的诱导作用:在经地非三唑诱导后,大鼠肝脏和小肠部位的UGT1A1、UGT1A3 mRNA的表达水平与空白组无显著差异,UGT1A6、UGT1A9 mRNA的表达水平比空白组明显的增加,肝脏对照组的UGT1A6灰度比值为1.31±0.28,而诱导2及4天的灰度比值分别为2.89±1.05、4.86±1.21;小肠对照组的UGT1A6灰度比值为0.72±0.21,诱导2及4天的灰度比值分别为1.38±0.28、2.48±0.11。肝脏对照组的UGT1A9灰度比值为0.64±0.24,而诱导2及4天的灰度比值分别为1.49±0.29、1.93±0.29:小肠对照组的UGT1A9灰度比值为0.40±0.11,诱导2及4天的灰度比值分别为0.94±0.23、2.23±0.49。并且随着诱导天数的增加,UGT1A6、UGT1A9 mRNA的表达也逐步增加,诱导天数与表达水平之间存在一定的线性关系。在诱导组中,肝微粒体和小肠微粒体中的4-硝基酚和异丙酚的代谢活性均明显强于空白组,但是诱导天数与表达水平之间无明显的线性趋势。结论:地非三唑对大鼠肝脏CYP1As在mRNA表达,蛋白表达和活性上有诱导作用;对大鼠肝脏和小肠部分的UGT1A6和UGT1A9在mRNA表达和蛋白活性上有诱导作用。