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髓样分化因子88(Myeloid Differentiation Factor88, MyD88)的经典作用是通过与TLR/IL-1R的TIR结构域相结合,引起NF-κB和丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen activated protein kinases, MAPKs)的活化,导致炎症因子的释放。近年的研究发现,MyD88在一些实质瘤的肿瘤细胞中表达增加,可能通过促炎症反应作用和非炎症作用促进肿瘤的进展。在本课题中,我们检测了MyD88在肝癌组织中的表达水平,分析了MyD88表达水平在肿瘤病人预后判断中的价值,利用体外实验和动物体内实验探讨了MyD88在肝癌细胞增殖和转移中的作用及其作用机制。通过对110例肝癌标本的癌组织和临近的癌旁组织免疫组织化学染色发现,MyD88在肝癌中的表达量增加：通过分析MyD88和临床指标之间的关系,证实MyD88的表达量和肝癌病人的临床病理分期、复发呈正相关；通过分析MyD88和肝癌病人预后之间的关系,证实MyD88表达量高的病人,预后比较差,统计学分析证实MyD88是一个独立的影响病人预后的因素。为了研究MyD88对肝癌细胞增殖的影响,我们进行了平板克隆和裸鼠体内成瘤实验,实验证实MyD88可以促进细胞克隆数目的增加和裸鼠移植瘤的生长。为了研究MyD88对肝癌细胞凋亡的影响,我们进行了流式细胞术和TUNEL凋亡检测实验,流式检测证实MyD88可以抑制肝癌细胞的凋亡,这一实验结果在裸鼠移植瘤和肝癌标本中得到了进一步的验证。转移是恶性肿瘤的一种重要的生物学特征,也是肿瘤病人死亡的重要原因。为了研究MyD88对肝癌细胞转移的影响,我们进行了细胞迁移、侵袭实验和裸鼠体内成瘤实验,细胞迁移和侵袭实验证实MyD88可以增加肝癌细胞的迁移和侵袭能力,裸鼠体内成瘤实验证实MyD88可以促进裸鼠肺部转移灶的形成。综上所述,MyD88可以通过影响肝癌细胞的增殖、凋亡和转移水平来促进肝癌的进展。为了研究MyD88在肝癌生长和转移中发挥作用的机制,我们进行了Real-time PCR、ELISA(Enzyme-linked immunosorbent assay)、NF-κB荧光素酶活性分析、凝胶电泳迁徙率改变实验(EMSA)和Western Blotting实验,证实了MyD88除了可以通过依赖TLR/IL-1R信号通路调节肿瘤进展相关基因的表达和NF-κB的活性,也可以通过不依赖TLR/IL-1R信号通路调节肿瘤进展相关基因的表达和NF-κB的活性。为了研究MyD88不依赖TLR/IL-1R调节NF-κB活性的机制,我们进行了NF-κB荧光素酶活性分析实验,并给予了LY294002(PI3K/Akt抑制剂)、U0126(Erk1/2抑制剂)或者SB203580(p38抑制剂),实验表明MyD88可以通过PI3K/AKT和p38/ERK调节NF-κB的活性。同时,Western Blotting实验证实MyD88可以通过不依赖TLR/IL-1R通路调节AKT和p38/ERK的活性。总之,通过临床标本的分析,我们首次阐明了MyD88在肝癌中的高表达及其与病人预后不良之间的关系。通过体内外实验，我们阐明了MyD88可以通过影响肝癌细胞的增殖、凋亡和转移水平来促进肝癌的进展。通过对机制的探讨,我们阐明了MyD88可以不通过TLR/IL-1R信号通路调节NF-κB的活性以及肿瘤转移和发展相关基因的表达。我们的研究结果可望为肝癌病人预后判断以及肝癌的生物治疗提供了新靶点。