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农药残留免疫检测技术是国内外小分子快速检测的重要领域之一。本文针对含氰基拟除虫菊酯类杀虫剂,设计、合成了一种通用抗原,并制备得到了一种通用抗体。用自己制备的拟除虫菊酯类农药中间体间苯氧基苯甲氰醇(CPBA)经过一步衍生化,得到间苯氧基苯甲氰醇丁酸酯(CPBA-BE),含有一个直链末端的羧基,用活性酯法在此羧基末端偶联载体蛋白牛血清蛋白(BSA)作为免疫抗原(CPBA-BE-BSA),用混合酸酐法在此羟基末端偶联载体蛋白鸡卵清蛋白(OVA)作间接ELISA反应的包被抗原(CPBA-BE-OVA)。用紫外/可见分光光度计对合成的人工抗原进行全波长扫描,与半抗原和BSA、OVA的扫描结果进行比较,结果显示偶联物具备半抗原和蛋白的双重特征吸收峰,因此可以判断偶联成功,并估算免疫原和包被原的偶联比分别为17.9和13.2。用上述合成的人工免疫抗原(CPBA-BE-BSA)免疫四只新西兰大白兔,制备出四管抗血清,效价依次为102400、25600、25600、6400,用效价最高的1号新西兰大白兔的抗血清,针对与半抗原结构最相似的氟胺氰菊酯,来建立间接ELISA检测方法。包被原浓度为2μg/mL,抗体工作浓度为血清稀释20000倍,在此工作浓度下对间接ELISA方法进行系列优化,最终得到最佳的工作条件为包被液为pH=9.6的碳酸盐缓冲液,包被条件是4℃过夜,封闭液为含0.1%明胶的包被缓冲液,封闭时间为37℃2小时,标准品稀释液为添加30%体积甲醇、pH=6.5的50mM PBS。一抗反应时间和二抗反应时间都是30分钟,显液液配比为1:5,显色时间为15分钟。在此条件下作氟胺氰菊酯的标准曲线,线性方程为Y=-0.2036X+1.2051,R2=0.9655;线性范围为0.023-10μg/mL,IC50为2.884μg/mL。并在此条件对13种拟除虫菊酯和代谢物进行交叉反应试验,抗体除可以识别氟胺氰菊酯外还对代谢物间苯氧基苯甲酸(PBA)和氯氟氰菊酯的IC50分别为4.898μg/mL和9.772μg/mL,交叉反应率分别为58.88%和29.51%,而对不含氰基的拟除虫菊酯生物丙烯菊酯、苄呋菊酯、炔呋菊酯、胺菊酯等都没有抑制作用,达到含氰基拟除虫菊酯类杀虫剂多残留快速检测的要求。并用氟胺氰菊酯在自来水中做了添加回收实验,在自来水中平均添加回收率在64.84-80.02%之间,标准偏差彽于2.20%,验证了本方法的准确性。