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食管癌（Esophageal Cancer,EC）是世界上最常见的恶性肿瘤之一，显著的地域性差异和性别差异（男：女=2～20：1）是EC最显著的流行病学特征。尽管食管癌患者年龄以≥50岁为主，但是青年食管癌患者（≤40岁）并非罕见，并有升高趋势。这些现象引发许多重要的科学问题：决定男女性食管癌分布差异的机制是什么?除相似的生活环境和致癌因素外，青年食管癌患者是否具有比中老年患者更为独特的致癌易感基因?但是，有关这方面的研究结果报道甚少。高发区人群普查和随访研究提示：食管上皮癌变是一多阶段演进过程，形态学上食管上皮癌变可以经过基底细胞过度增生（BCH）、间变（DYS）、原位癌（CIS）最终发展成浸润癌（SCC），其分子学机制尚不十分清楚。性激素及其受体是性别差异的重要决定因素。一个十分重要的现象是：正常成人食管上皮中无性激素受体表达，而食管鳞癌组织中存在性激素受体。但是，这些激素及其受体在食管癌变多阶段演进过程的变化特征及其意义尚未见报道。本研究旨在通过分析性激素及其受体在食管癌变过程中的变化特征及其规律，探讨其与食管癌变发生和发展的关系，加深对食管癌变分子学机制的了解，并为食管癌的二级预防和内分泌治疗提供可靠的依据和手段。Ⅰ．1．1材料与方法 研究对象来自河南食管癌高、低发区无症状人群和高发区原发性食管癌手术患者。无症状人群组随机选取高、低发区健康体检者各60人，两组男、女各30人；44例原发性食管癌手术切除标本来自食管癌高发区，男性29例，女性15例。对河南食管癌高、低发区无症状人群和高发区原发性食管癌手术患者清晨7时空腹上肢静脉血，采用放免法测定血清雌二醇（estradiol，E2）和睾丸酮（testosterone，T）。142例食管癌手术切除标本来自高发区当地医院存档资料。所有组织均经85％乙醇固定、石蜡包埋、连续切片，进行组织病理学检查和免疫组化检查。免疫组化采用卵白素-生物素-辣根过氧化氢酶复合物（ABC）法，检测雌郑州大学硕士学位论文2003届激素受体（estrogen recePtor，ER）和孕激素受体（progestogen reeeptor，pR）蛋白表达。对其中9例原发性食管癌手术切除标本分别取癌和癌旁4.0一5.omg新鲜组织克进行ER蛋白W七stem印迹分析。统计学分析采用t检验、Wilcoxon秩和检验、Loglsti。回归分析和才检验，线性趋势检验，检验标准取。=0 .05。1.1 .2结果1.1 .2.1血清雌激素水平 男性低发区和高发区无症状人群以及高发区食管癌患者血清雌激素水平分别为70.50肚11.300、54.684士18.159、42.33肚16.016（pg/ml），女性低发区和高发区无症状人群以及高发区食管癌患者血清雌激素水平分别为87.01肚13.910、52.044士21.790、32.998士19.339，低发区居民雌激素水平明显高于高发区无症状居民及食管癌患者（P<0.01）;血清雄激素水平:男性低发区和高发区无症状人群以及高发区食管癌患者的血清雄激素水平分别为4.10肚1 .500、5.485士2.485、5.555士2.648（ng/ml），女性低发区和高发区无症状人群以及高发区食管癌患者的血清雄激素水平分别为0.618切.076、1.795幼.959、1.985切.990，低发区居民雄激素水平明显低于高发区无症状居民及食管癌患者（P<0 .01）。对血清性激素水平与食管癌病理特征的关系研究显示:女性患者随分化程度降低、TNM分期增高、淋巴结转移阴性和阳性之间雌激素递减（正相关趋势），雄激素递增（负相关趋势），但无显著性差异（P>0.05），男性患者各分化水平、有无淋巴结转移、TNM分期之间无显著性差异（P>0.05）。1.1.2.2食管癌组织ER、PR免疫组化测定 簇40岁、40一60岁、>60岁三组ER的免疫阳性表达率分别为51%、47%、33%，阳性率随年龄增大而递减（P<0.05）;PR在三组不同年龄段的表达率分别为巧%、40%、29%，中老年患者PR阳性率显著高于青年患者。40一60岁、>60岁两组患者ER主要定位于细胞核，成40岁组ER主要定位于细胞浆。男、女性食管癌患者ER表达率分别为40%、53%，男性高于女性，但差异无显著性（P>0.05）;男女性食管癌组织PR表达率分别为37%、41%，但差异无显著性（P>0 .05）。2全文摘要11.2.3正常食管上皮和各级癌前病变组织ER免疫组化测定 正常食管上皮中未见ER表达（0/12）;而BCH和DYS组织ER表达率分别为9%（3/32）、40%（8/20），且表达以细胞浆为主;随病变程度的加重，CIS和SCC组织阳性率分别为53%（1 8/34）和49%（24/49），ER免疫阳性反应以细胞核为主，NOR与DYS、CIS、SCC，BCH与DYS、CIS、SCC之间，ER蛋白免疫阳性表达率差异有显著性（P值均<0.05）。ER免疫阳性百分率和病变程度（NOR一BCHDYS一Cls一SCC）呈线性正相关关系。1.12.4W七stem印迹分析BCH组织ER表达位于66KD条带;而DYS组织位于66、67KD条带;SCC组织与DYS相似，但以67KD条带表达更为显著。1.1 .2.5 ER与P53表达关系分析 从正常到各级病变（NORBCH一DYS一CIS一SCC）ER阳性率依次为0%（0/12）、9%（3/32）、40%（8/20）、53%（18/34）、49%（24/49），P53阳性率依次为46%（5/12）、58%（19/34）、75%（15/20）、82%（28/34）、85%（42/49），两者都有相同的随病变加重而