【摘 要】
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目的研究APOA2基因表达水平对HBV复制及表达的影响;分析APOA2与CHB病情进展的相关性。方法构建重组APOA2基因过表达质粒,同时设计并合成APOA2-si RNA,分别转染HepG2.2.15细胞,培养72小时后使用RT-q PCR、RT-PCR、WB和ELISA等方法对比检测转染前后细胞内外APOA2、HBV-DNA、HBs Ag、HBe Ag、HBc Ag等指标的变化。依据纳入标准收
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目的研究APOA2基因表达水平对HBV复制及表达的影响;分析APOA2与CHB病情进展的相关性。方法构建重组APOA2基因过表达质粒,同时设计并合成APOA2-si RNA,分别转染HepG2.2.15细胞,培养72小时后使用RT-q PCR、RT-PCR、WB和ELISA等方法对比检测转染前后细胞内外APOA2、HBV-DNA、HBs Ag、HBe Ag、HBc Ag等指标的变化。依据纳入标准收集临床标本,正常对照组(N组)、慢性HBV携带组(CHB1)、HBe Ag阳性CHB组(CHB2)和乙肝肝硬化失代偿期组(CHB3),各组50例作为研究对象;另外将首次HBV-DNA检测含量大于10~7IU/ml以上的患者作为研究对象,依据治疗前和治疗6个月HBV-DNA含量降低程度进行分组,治疗后HBV-DNA≥10~5IU/ml者为第1组,10~5IU/ml>HBV-DNA≥10~2IU/ml为第2组,低于检测下线为第3组;利用免疫投射比浊及RT-q PCR法分别检测上述患者空腹静脉血中APOA2及HBV-DNA含量。各组检测结果使用t检验进行差异性比较,分析APOA2含量与CHB病情进展的相关性。结果HepG2.2.15细胞APOA2 m RNA和蛋白水平明显低于HepG2细胞(P<0.05);HepG2.2.15细胞中APOA2基因过表达时,细胞内外HBV-DNA、HBs Ag、HBe Ag和HBc Ag含量均明显降低(P<0.05);APOA2基因沉默时上述指标均显著升高(P<0.05);APOA2在N组、CHB1组、CHB2组、CHB3组之间呈现逐渐降低趋势,且组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);在1组、2组、3组之间APOA2含量呈递增趋势,各组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论APOA2基因可能具有抑制HBV-DNA复制及表达的作用;在HBV引起的CHB病程进展中起着抑制病情进展的作用。
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