论文部分内容阅读
B淋巴细胞刺激因子(B-cell activating factor belonging to the TNF family,BAFF),又称为BLyS、THANK、TALL-1、TNFSF13B,是最新发现的一个肿瘤坏死因子家族(TNF)的成员,目前的研究结果充分表明它在人体B淋巴细胞的存活及成熟过程中扮演着关键调控角色。小鼠在被敲除BAFF基因后,它的次级淋巴器官囊外及过渡区的B细胞完全缺失,几乎完全丧失了免疫能力,表明BAFF对维持机体正常免疫功能不可缺少的作用。由于BAFF的特异性B细胞免疫增强活性,2000年11月,美国FDA己正式批准重组人胞外可溶性功能区BAFF(sBAFF)进入人体Ⅰ期临床试验,用于治疗普通变异免疫缺乏症(CVID)和IgA缺陷症患者。
大量实验证明,某些重组细胞因子(如IL-2、CD40L)作为免疫佐剂配合疫苗使用可以显著提高疫苗的免疫效力,同时还可以提高动物对免疫抑制疾病的抵抗能力。细胞因子用于畜禽细菌病毒病的治疗还能克服传统药物(抗生素及化学药物)副作用大的缺点。BAFF对激活B细胞的促抗体分泌、促增殖的生物学活性强烈提示:BAFF很可能像己成功应用于经济畜禽疫病防治的细胞因子免疫佐剂IL-2、CD40L一样,具有分子免疫佐剂样效应。关于重要经济畜禽BAFF同源基因的克隆、鉴定及其免疫佐剂效应的理论与应用研究,国际上还未见有报道。
本课题选取了一些重要的与我国人民生产生活密切相关,具备重要经济价值的畜禽(肉鸭、肉鹅、家猪、奶牛、长毛兔),利用现代分子生物学、生物化学、细胞生物学等技术并辅助生物信息学分析手段,对它们的BAFF同源基因进行了克隆、鉴定及生物学活性研究。
我们在国际上:
(1)首先完成了对这些重要经济畜禽BAFF基因的克隆及分子鉴定,所获得的BAFFcDNA及genomicDNA序列都得到了GenBank数据库的收录,进一步还对这些BAFF基因展开了多方面未知信息的研究(包括基因组织结构、拷贝数、mRNA组织表达分布、三级结构预测等分析)。
(2)首先完成了肉鸭和家猪sBAFF蛋白的重组生产和体外活性检测,并进一步通过体内免疫接种实验证明了鸭sBAFF蛋白具有较强的分子免疫佐剂活性,为最终鸭sBAFF作为免疫佐剂的开发与应用提供了理论依据和实验基础。其作用分子机制的研究本实验室正在进行之中。
(3)首先通过体外活性实验证明了鸭与人sBAFF蛋白,及猪与人sBAFF蛋白彼此间具有功能交叉活性(functional cross-reactivity)。
(4)首次构建和分析了已知物种BAFF同源蛋白的分子系统进化树,从分子水平上验证了物种的进化关系。