陕北荞麦麸皮中黄酮类化合物的提取及纯化研究

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荞麦(学名:Fagopyrum esculentum),是一种在低温环境下生长的短季蓼科植物。主要包括甜荞和苦荞两种。甜荞主要分布在西北、华北、东北地区,是一种药食兼备的食品。其麸皮中含有丰富的膳食纤维、蛋白质、淀粉、矿物质、黄酮类化合物等,但由于荞麦麸皮口感差,不易食用,在加工中大多被作为饲料使用,或被丢弃。若能从中提取黄酮类化合物,不但可以开发利用新资源,为工业化生产提供可靠的理论依据和技术支持,而且还可以提高荞麦麸皮的利用率,改变贫困地区经济落后的现状。因此,本试验以陕北甜荞麦麸皮为原料,研究了不同提取及纯化方法对荞麦麸皮中黄酮类化合物提取及纯化的最佳工艺,并对其纯化产品中黄酮类化合物进行了分析鉴定。其主要研究内容与结论如下:   1.分别采用乙醇浸提法、超声波辅助提取法、微波加热提取法、酶法-超声波相结合提取法和酶法-半仿生提取法对甜荞麦麸皮中黄酮类化合物最佳提取工艺条件进行了研究。乙醇浸提法的最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数50%,料液比1:40,浸提温度70℃,浸提时间2.5h,浸提三次;超声波辅助提取法的最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数70%,料液比1:50,超声温度70℃,超声时间30min,超声功率200W,超声三次;微波加热提取法的最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数60%,料液比1:50,加热时间90s,微波功率360W,提取两次;酶法-超声波相结合提取法的最佳提取工艺条件为:加酶量0.54mg/mL,料液比1:45,pH值4.6,酶解温度40℃,酶处理时间71min;酶法-半仿生提取法的最佳提取工艺条件为:料液比1:43,提取温度68℃,提取时间1.6h。   2.通过对不同提取方法最佳工艺条件下总黄酮得率的比较发现:酶法-超声波相结合提取法对总黄酮得率的影响最大,提取的总黄酮得率最高,达到3.16%,比乙醇浸提法总黄酮得率提高了30.58%;其次是超声波辅助提取法,其总黄酮得率2.91%,比乙醇浸提法提高了20.25%。   3.分别采用超滤法和大孔吸附树脂分离纯化技术对荞麦麸皮黄酮粗提液的最佳纯化工艺进行了研究。超滤法纯化的最佳工艺条件:分子截流量为10000,样液浓度为0.5mg/mL,样液温度为30℃,操作压力为2bar;大孔吸附树脂纯化的最佳工艺条件:大孔吸附树脂的型号为:HPD100,吸附流速为1mL/min,最大上样量为10BV,上样液浓度为0.5mg/mL,解吸剂体积分数为60%,解吸剂流速为1mL/min,解吸剂用量为6BV。通过两种纯化方法的纯化效果与粗提液相比较发现:大孔吸附树脂纯化效果较好,且总黄酮纯度高,达到86.42%。大孔吸附树脂纯化产品总黄酮纯度比粗提液提高了5.6倍,而超滤法则提高1.2倍。   4.采用显色反应、薄层层析法、紫外光谱法、高效液相色谱法对甜荞麦麸皮纯化产品中的黄酮类化合物进行了分析鉴定。结果发现甜荞麦麸皮中含有大量的黄酮类化合物,且主要包括黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮、二氢黄酮醇类、异黄酮类和查尔酮类。并利用薄层层析法和高效液相色谱法鉴定出酶法-超声波提取和超声波辅助提取的纯化产品中都含有芦丁或与芦丁类似的黄酮类化合物,其含量分别为7.51%和2.80%。从而说明酶法-超声波相结合提取法更有利于荞麦麸皮中芦丁的提取,为荞麦麸皮中芦丁的研究提供了理论依据。   本文对陕北甜荞麦麸皮中黄酮类化合物提取及纯化工艺进行了系统的研究,并采用了酶法-超声波相结合等提取法和大孔吸附树脂分离纯化等技术提取及纯化荞麦麸皮总黄酮,并对其纯化产品进行了分析鉴定,获得了比较理想的提取及纯化效果,为甜荞麦麸皮这一副产品的开发与利用提供了坚实的理论依据。
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