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大肠癌是我国较为常见的恶性肿瘤之一,且其发病率呈逐年上升的趋势。虽然大肠癌的诊断和外科治疗都已取得了长足的进步,但术后总体的5年生存率仍在50%—65%,其原因主要是早期发现、早期诊断率很低,术后复发和转移。在大肠癌的治疗上,提出了综合治疗的模式,即包括手术、化疗、放疗和生物治疗。其目的不仅是提高治愈率,而且要提高病人的生活质量。以肿瘤免疫治疗为基础的生物治疗近年来日益受到重视。基因治疗则是肿瘤生物治疗的崭新领域。 肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNF)相关的凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)是新近发现的一种能介导细胞凋亡的信号分子,亦称调亡素-2配体(Apo-2L)TRAIL通过与其特异性受体的相互作用来发挥促进凋亡作用。但与Fas不同,TRAIL对机体正常组织不具有明显的毒性作用,只选择性地诱导肿瘤源性细胞和转化细胞发生凋亡,而被认为是一种安全的抗肿瘤制剂。但也有一些研究认为有部分肿瘤细胞对TRAIL诱导的凋亡作用并不敏感,但联合部分化疗药物后能增加其对TRAIL的敏感性。为此,我们观察了TRAIL基因转染大肠癌细胞株RKO后其对细胞株生长率及凋亡率的影响,并联合化疗药物阿霉素,观察联合应用阿霉素后上述作用是否有所增强。并分析了一例低累积剂量阿霉素引发的心脏毒性病例。 材料与方法 腺病毒载体Ad/GT-TRAIL,Ad/GT-LacZ,Ad/GT-Bax及Ad/PGK-GV16,分别携带人TRAIL、BAX和细菌LacZ基因。阿霉素,人胚肾细胞株293,人大肠浙江大学硕士学位论文 中文摘要癌细胞株 RKO。将重组腺病毒载体(Ad)介导的 TRAIL基因作用于大肠癌细胞株ngo,并应用低剂量的阿霉素对之进行干预。通过MTT比色法与流式细胞仪研究分析其对RKO细胞的作用效果,采用SPSS10对统计软件包分析结果。以RT-PCR分析经联合应用阿霉素后,TRAIL基因的表达是否有所增加。 结果和讨论1、各种腺病毒的滴度均约为 5 X 10‘十/ml。2、MO细胞的生长能轻微地被载体病毒抑制及显著地被TRAIL抑制,抑制率 分别为门.9%和扣.l%。3、阿霉素不能显著增强TRAIL对KKO细胞的抑制作用,但能显著增强其诱导 凋亡作用,凋亡率从 19.8O升至 40.0O。4、RT-PCR结果提示联合应用阿霉素后,TRAIL基因的表达并未增强。 结 论1、TRAIL能有效抑制ngo的生长及诱导其发生凋亡。2、联合阿霉素后,TRAIL对RKO的诱导凋亡作用明显增强。3、阿霉素不是通过增加 TRAIL基因的表达来实现上述作用的。