【摘 要】
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研究目的 本研究拟通过对自由基的检测及细胞、生物体的衰老生物学改变相关性的研究，探讨D-半乳糖(D-galatose，D-gal)诱导后的自由基损伤，骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem ce
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研究目的 本研究拟通过对自由基的检测及细胞、生物体的衰老生物学改变相关性的研究，探讨D-半乳糖(D-galatose，D-gal)诱导后的自由基损伤，骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)衰老、生物体衰老三者之间的相互关系，以期能够揭示在衰老过程中，自由基引起生物体衰老的细胞学机理，试图在生物体及细胞水平上建立一个良好的老化模型，为认识衰老和最终找到推迟衰老的方法提供实验平台。 研究方法 1．小鼠衰老模型的建立：取昆明种小鼠40只，称重，随机分成2组，每组20只。分对照组、造模组；对照组每天给予生理盐水0.3ml颈背部皮下注射，造模组给予5％D-gal 0.3ml颈背部皮下注射。连续给药60d。 2．小鼠衰老指标的检测：观察两组小鼠的体征及行为学变化，检测大脑组织内、血清内SOD及MDA含量的变化，检测皮肤SOD、MDA及羟脯氨酸含量变化。 3．MSCs衰老模型的建立：取2月龄SD大鼠MSCs分离培养至第3代，置于含8g／L D-gal的培养液中再传至第3代作为诱导组，而在原培养液中继续培养至第6代的为对照组。 4．MSCs衰老指标的检测：通过光镜、透射电镜观察两组MSCs形态和结构变化，绘制两组细胞的生长曲线，进行β-半乳糖苷酶染色，流式细胞仪检测细胞周期分布变化和单细胞凝胶电泳检测DNA损伤方法检测其衰老后的生物学行为变化，检测两组细胞内SOD及MDA的
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