目的:本研究通过比较分析自酸和全酸粘接剂不同涂布次数对牙体粘接界面封闭性的影响,探讨粘接剂的最佳涂布方式,评价不同粘接系统对牙体粘接界面边缘封闭性的影响,为临床上合理使用和正确选择粘接剂提供实验参考。方法:实验一:收集近一个月内拔除的第三磨牙35颗（要求牙齿形态正常,牙冠完整、无隐裂,牙根无吸收且根尖孔完全闭合）,刮治器刮除牙结石、手术刀去净牙周膜,保存于4℃、生理盐水中。在其颊舌侧釉牙骨质界冠方1mm制备4mm×3mm×2mm的洞形。随机分为7组,每组5颗,10个洞形,10个样本,分别为A0组（空白对照组）;B1组（自酸粘接剂涂布1次）;B2组（自酸粘接剂涂布2次）;B3组（自酸粘接剂涂布3次）;C1组（全酸粘接剂涂布1次）;C2组（全酸粘接剂涂布2次）;C3组（全酸粘接剂涂布3次）。每组按照操作要求对粘接界面进行处理。采用分层法完成树脂充填后,用自凝树脂封闭根尖孔,距洞缘周围1mm处之外均匀涂指甲油两遍。将所有样本牙浸泡于37℃、0.1%罗丹明B异硫氰酸盐的酒精溶液中24h,用蒸馏水冲洗去净染料^[1]。用金刚砂车针将牙齿自颊舌方向于实验区域平行于牙体长轴连续切取2片,用600、800、1200目砂纸打磨试件至透光。激光扫描共聚焦显微镜测量微渗漏及纳米渗漏的长度和观察其形态的变化。实验二:按照实验一的纳入标准选取离体第三磨牙36颗,去除牙合面牙釉质,使牙本质暴露,形成均匀一致的粘接面。随机分为6组,每组6颗牙,分别为D1组（自酸粘接剂涂布1次）;D2组（自酸粘接剂涂布2次）;D3组（自酸粘接剂涂布3次）;E1组（全酸粘接剂涂布1次）;E2组（全酸粘接剂涂布2次）;E3组（全酸粘接剂涂布3次）。将粘接剂与罗丹明B混合后按照操作要求对粘接界面进行处理（处理方式与实验一相同）,堆塑1mm的树脂层后,用自凝树脂封闭根尖孔。所有样本牙浸泡于37℃生理盐水中24h,用金刚砂车针将牙齿自颊舌方向于实验区域平行于牙体长轴连续切取4片,用600、800、1200目砂纸打磨试件至透光。应用激光扫描共聚焦显微镜测量牙本质小管中的树脂单体渗入深度及观察混合层形态。实验所得数据应用SPSS 23.0软件进行统计学分析:数值采用（（?）±s）表示,数据经正态性检验及方差齐性检验,采用单因素方差分析（One-way ANOVE）比较各组均数之间的总体差异（P<0.05）,采用LSD-t法进行两两比较,检验水准α=0.05,P<0.05表示差异具有统计学意义。结果:（1）微渗漏结果显示:B2组（自酸涂布2次）及C2组（全酸涂布2次）的微渗漏值最低（P<0.05）;两种粘接系统涂布相同次数时的微渗漏值比较,差异无统计学意义（P均>0.05）。（2）纳米渗漏结果显示:B2组（自酸涂布2次）及C2组（全酸涂布2次）的纳米渗漏值最低（P<0.05）;两种粘接系统涂布相同次数时的纳米渗漏值比较,自酸粘接系统均低于全酸粘接系统（P均<0.05）。（3）D1组（自酸涂布1次）及E1组（全酸涂布1次）的树脂单体渗透值最低（P<0.05）,D2组与D3组、E2组与E3组比较,差异无统计学意义（P>0.05）;两种粘接系统涂布相同次数时的树脂单体渗透值比较,自酸粘接系统均低于全酸粘接系统（P均<0.05）。（4）镜下混合层形态观察结果显示,两种粘接系统涂布1次时混合层较薄且不均匀,树脂单体有断裂,涂布2次时混合层较均匀,树脂单体较长且无明显断裂,涂布3次时形成的混合层不均一,树脂单体渗透较长但有断裂。结论:（1）自酸和全酸粘接系统均在涂布2次时,微渗漏、纳米渗漏最低,当涂布次数达到3次时,微渗漏、纳米渗漏值变大,自酸和全酸粘接系统的微渗漏无显著差别,全酸粘接系统的纳米渗漏高于自酸粘接系统。（2）自酸和全酸粘接系统涂布2次时,树脂单体的渗透长度最大、最均匀,形成混合层的质量最高,全酸粘接系统树脂单体长度大于自酸粘接系统。