肝纤维化是一种慢性肝损害所致的病理改变。在肝纤维化病程的进展过程中,肝内正常的微环境被破坏,肝实质细胞和间质细胞之间的相对平衡被打破。肝星状细胞是肝脏间质细胞中的重要成员,其在肝脏内环境稳态的维持及肝脏疾病的发生发展过程中起到十分重要的作用。肝星状细胞的生物学功能在肝纤维化过程中发生的改变备受关注。Bcl-2/adenovirus E1B19kDa interacting protein2like2(BNIPL-2)基因是本实验室通过功能筛选获得的影响细胞生长的人类新基因。前期的研究表明该基因可以促进细胞的凋亡,并且可能影响细胞骨架的重塑和细胞的运动。但目前尚未有BNIPL-2基因与人类疾病相关的研究报道,有关其在生理和病理情况下对特定细胞生物学功能影响的研究目前仍然很少。本研究中,通过免疫组织化学和real-time PCR的方法比较了肝纤维化标本和正常肝组织中BNIPL-2的表达水平。结果显示在肝纤维化组织中BNIPL-2的蛋白和mRNA水平有明显升高。随后我们观察到与肝脏损伤相关的磷脂代谢产物溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid, LPA)处理肝星状细胞株LX-2后,BNIPL-2的mRNA水平也发生相应升高。为了进一步研究BNIPL-2对于肝星状细胞生物学功能的影响,我们通过慢病毒载体系统建立了BNIPL-2过表达LX-2细胞株。体外细胞功能学实验表明：1) BNIPL-2可以使LX-2细胞的丝状伪足增多,细胞形态发生改变；2) BNIPL-2能够促进LX-2细胞的运动、收缩以及在CollagenI上的粘附能力；3) BNIPL-2过表达的LX-2细胞对LPA等活性物质刺激的敏感性亦相应提高。Rho信号通路被证实在肝星状细胞激活后生物学功能的改变过程中扮演重要的角色。我们的研究还发现BNIPL-2过表达之后,LX-2细胞中RhoA的活化水平有一定程度的升高。以上结果提示BNIPL可能通过影响RhoA活性从而改变了肝星状细胞的生物学性状,进而影响肝星状细胞在肝纤维化进程中的生物学功能,为进一步阐明肝纤维化过程所中BNIPL对肝脏星状细胞功能的影响及其分子机制提供了新的线索。细胞凋亡既可以发生在生理过程中,也可以存在于病理情况下,生理性凋亡对于生物的生长发育及维持内环境平衡具有重要的意义,同时凋亡与肿瘤等疾病的发生发展有着密不可分的关系。细胞凋亡又名细胞程序化死亡,其过程是一个主动的调控过程,线粒体通透性的改变在这一过程中发挥重要的调节作用。Bcl-2家族是重要的细胞凋亡调节因子,包括抑制和促进细胞凋亡两类,Bcl-2家族蛋白成员间的相互作用对线粒体介导的细胞凋亡起调控作用。Bcl-2/adenovirus E1B19kDa interacting protein2like2(BNIPL-2)对肿瘤细胞的生长具有抑制作用,其被视为Bcl-2家族的新成员。我们的研究初步发现,经十字孢碱(Staurosporine, STS)诱导的凋亡细胞中BNIPL-2mRNA表达水平出现升高的趋势。随后在HepG2细胞系和H460细胞系中过表达BNIPL-2和Bcl-2基因,并用STS对细胞进行处理。结果显示在相同时间节点,与对照组细胞相比,BNIPL-2过表达的两种细胞凋亡率明显升高,Bcl-2过表达的细胞凋亡率显著降低,而BNIPL-2和Bcl-2共表达的细胞凋亡水平则介于二者之间,接近于对照组水平。以上结果提示BNIPL-2可以增加肿瘤细胞对凋亡诱导剂的敏感性,其在细胞凋亡过程中与Bcl-2发挥相反的作用。其是否通过二聚化形式拮抗BCL-2的抑制凋亡功能还有待进一步的研究,以期更为全面地阐明BNIPL-2对于细胞凋亡的影响。