黄栌枯萎病菌Septin家族的功能研究

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由大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb.)引起的黄栌枯萎病已对北京等地红叶景观造成了严重的威胁。黄栌枯萎病是一种系统性植物病害,药剂作用效果差,且其病原菌在发病后期形成抗逆性极强的微菌核,目前尚无有效的防治措施。微菌核在病害循环中发挥极其关键的作用,揭示微菌核形成机制的分子基础具有重要的理论意义和实践价值。因此,本研究围绕Septin家族,采用反向遗传学方法,阐明该基因家族在微菌核形成和致病过程中的作用机制。研究结果如下:1)大丽轮枝菌Septin家族含有4个成员,即VdSep3(VDAG00736)、VdSep4(VDAG07169)、VdSep5(VDAG04382)和VdSep6(VDAG01474)。2)敲除VdSep3、VdSep4和VdSep6导致了突变体的孢子产量降低,而VdSep5基因缺失后突变体孢子产量相对于野生型增加。此外,所有的Septin基因均调控菌丝的极性生长以及几丁质的分布和运输。3)VdSep3和VdSep6基因分别对微菌核形成以及黑色素合成相关基因起负向调控作用和正向调控作用,而VdSep4和VdSep5基因对微菌核形成以及黑色素的合成影响不明显。4)VdSep4基因的缺失会使大丽轮枝菌对几丁质抑制剂、高渗透胁迫、部分农药的抗性增强,而其余3个Septin家族基因的缺失普遍会导致对逆境胁迫的抗性降低,表明Septin家族基因参与了逆境胁迫的应答过程,但其分工不同。5)VdSep3、VdSep4以及VdSep5基因的缺失使侵入钉形成数量降低,菌丝侵入寄主的时间以及数量出现了延迟或降低,使得接种△VdSep32、△VdSep41和△VdSeP51的烟草病害程度显著低于野生型,而VdSep6的缺失使突变体失去了直接侵入寄主植物的能力,表明Septin家族基因对大丽轮枝菌的侵染过程至关重要。综上,本研究揭示了大丽轮枝菌中的Septin家族基因在菌丝的生长发育、微菌核形成、胁迫应答以及致病性等过程中发挥着重要的调控作用。此外,根据各Septin基因突变体的表现,可以推断不同的Septin家族基因在细胞内具有不同的分工。
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