目的:比较度洛西汀（Duloxetine,DUL）在正常大鼠和糖尿病模型大鼠体内的药代动力学特征,研究度洛西汀和氟西汀（Fluoxetine,FLU）、度洛西汀和阿戈美拉汀（Agomelatine,AGO）基于血浆蛋白结合的相互作用,探讨不良反应发生的可能原因,进而为临床的合理用药提供理论基础。方法:（1）DUL在正常大鼠与糖尿病模型大鼠的血药浓度比较研究。建立液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法测定大鼠血浆中DUL的浓度。以地西泮（Diazepam,DIA）为内标,色谱柱为WATERS Xterra^?RP18（4.6×100 mm,3.5μm）,以甲醇:水(5 mmol·L^-1醋酸铵-0.3%甲酸)=75:25为流动相,流速为0.6 mL·min^-1,分析时间5.5 min。用电喷雾离子源,正离子多反应监测方式检测,DUL和内标DIA的检测离子分别为DUL:m/z 298.2→154.0,DIA（IS）:m/z 285.5→154.0。采用甲醇直接沉淀蛋白对样品进行预处理。采用腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,将正常组与糖尿病模型组大鼠分别分为单次给药组和多次给药组,每组相同剂量(40mg·kg^-1)灌胃给予DUL,于眼眶静脉丛采血测定血药浓度,用DAS 3.2.3软件计算药动学参数,用SPSS 22软件进行统计分析。（2）DUL在正常大鼠与糖尿病模型大鼠的组织分布比较研究。采用DUL在大鼠血浆中的分析条件,对大鼠组织（包括大脑、心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、胃、小肠、大肠、睾丸、肌肉、脂肪）匀浆液进行方法学考察和定量测定。正常组与糖尿病模型组大鼠分别按照40mg·kg^-1的剂量灌胃给予DUL,正常组大鼠分别于给药后1,2,5,11,24 h分离大脑、心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、胃、小肠、大肠、睾丸、肌肉、脂肪,制备成组织匀浆液后测定DUL的浓度。糖尿病模型组大鼠于给药后2 h（即血浆中药物的达峰时间）分离上述组织脏器制成匀浆并测定DUL的浓度,并用SPSS 22软件将各组织中DUL的含量进行统计分析。（3）DUL和FLU、DUL和AGO基于人血浆蛋白结合相互作用的研究。建立LC-MS/MS法同时测定人血浆和磷酸缓冲溶液（Phosphate buffer solution,PBS）中DUL,FLU,AGO的浓度。选用WATERS Xterra^?RP18（4.6×100 mm,3.5μm）色谱柱,流动相为甲醇（A）和含0.3%甲酸的5 mmol·L^-1醋酸铵水溶液（B）,梯度洗脱（0⁰.1 min,65%A;0.1².5 min,65%-80%A;2.5⁴.5 min,80%A;4.6¹0 min,65%A）。用电喷雾离子源,正离子多反应监测模式,待测物和内标地西泮的检测离子分别为:DUL:m/z 298.2→154.0;FLU:m/z:310.1→148.2;AGO:m/z 244.1→185.0;DIA（IS）:m/z 285.5→154.0。将含药血浆分为对照组和实验组,对照组即DUL组、FLU组、AGO组;实验组即DUL+FLU组、DUL+AGO组。每组设置低、中、高三种浓度梯度,用平衡透析法分别测定每种药物的血浆蛋白结合率,将相同血药浓度下实验组药物的血浆蛋白结合率和对照组进行比较。结果:（1）DUL在正常大鼠与糖尿病模型大鼠的血药浓度比较研究。LC-MS/MS法测定大鼠血浆中DUL的浓度。方法学考察结果表明,在大鼠血浆中,内源性物质均不干扰DUL和内标的测定,测定方法具有较好的特异性。DUL在大鼠血浆中10⁵000 ng·mL^-1的浓度范围内线性关系良好;批內、批间精密度均在可接受范围内,提取回收率较高且可重现,稳定性较好,且基质效应不影响测定。正常大鼠与糖尿病模型大鼠分别灌胃给予40mg·kg^-1DUL,单次给药的主要药代动力学参数为:糖尿病组:C_max为（1185±190.0）ng·mL^-1,AUC_0-∞为（8398±1835）ng·mL^-1·h,t_max为（1.6±0.4）h,t_1/2z为（3.6±0.9）h;正常组:C_max为（368.1±40.7）ng·mL^-1,AUC_0-∞为（4145±640.1）ng·mL^-1·h,t_max为（1.6±0.3）h、t_1/2z为（4.1±0.8）h。多次给药的主要药代动力学参数为:糖尿病组:C_max为（2597.5±969.5）ng·mL^-1,AUC_0-∞为（24597±13413）ng·mL^-1·h,t_max为（1.8±0.3）h,t_1/2z为（5.9±1.6）h;正常组:C_max为（998.4±279.6）ng·mL^-1,AUC_0-∞为（9143±2442）ng·mL^-1·h,t_max为（1.9±0.2）h、t_1/2z为（5.4±1.8）h。在单多次给药试验中,糖尿病组的DUL暴露量(C_max与AUC)均显著高于正常组,该结果提示糖尿病状态会使DUL的吸收增强,生物利用度提高,暴露量增大。（2）DUL在正常大鼠与糖尿病模型大鼠的组织分布比较研究。方法学考察结果表明,在大鼠上述组织匀浆液中,内源性物质均不干扰DUL和内标的测定,测定方法具有较好的特异性。DUL在大鼠组织匀浆液中0.1¹00μg·mL^-1的浓度范围内线性关系良好;批內、批间精密度均在可接受范围内,提取回收率较高且可重现,稳定性较好,且基质效应不影响测定。正常大鼠与糖尿病模型大鼠分别灌胃给予40mg·kg^-1DUL后,两组的组织分布情况基本类似,除胃肠道以外,主要分布在肝脏、肺、脾脏、肾脏这些血液流动或体液交换较丰富的组织中。糖尿病组大脑中的药物含量是正常组的2倍(15.71±6.82vs8.431±4.79μg·g^-1),但是无显著性差异,该结果提示在糖尿病状态下DUL在大脑中的含量有增高的趋势。（3）DUL和FLU、DUL和AGO基于人血浆蛋白结合相互作用的研究。LC-MS/MS法同时测定人血浆和PBS中DUL,FLU,AGO的浓度。在血浆和PBS这两种基质中,内源性物质均不干扰待测物和内标的测定,有良好的特异性。三种待测物的精密度、提取回收率、基质效应、稳定性考察,均在可接受的范围内。在4℃放置72 h后,待测药物达到透析平衡。平衡透析法测得的DUL,FLU和AGO血浆蛋白结合率的分别为（96.59±0.47）%,（94.54±0.22）%,（95.61±1.11）%,且不具有浓度依赖性。实验组中相互作用的两种药物的血浆蛋白结合率,与对照组相比,无显著性差异。该结果表明DUL和FLU,DUL和AGO不存在血浆蛋白结合的相互作用。结论:（1）在正常大鼠与糖尿病模型大鼠的药代动力学比较研究中,糖尿病组血浆中DUL的暴露量显著增大,且大脑（靶组织）中DUL的药量也有增高的趋势,推测可能是糖尿病状态下DUL的吸收增强、口服生物利用度升高导致的。糖尿病状态下DUL的不良反应增多,可能和其暴露量增大有关。（2）DUL和FLU、DUL和AGO基于人血浆蛋白结合的相互作用的研究结果提示,DUL和FLU、DUL和AGO联合用药时所产生的药物相互作用及不良反应的增多,不是源于药物血浆蛋白结合率的变化,在今后的研究中,需更多的从药理学作用机制上做进一步探索。