β-甘露聚糖酶产生菌的诱变育种及其应用开发研究

来源 :中国科学院成都生物研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lxkef
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Bacillus sp.M<,50>是胞外β-甘露聚糖酶的高产菌株,60﹪饱和度的硫酸铵可将酶沉淀完全,粘度实验证实该酶为液化型内切酶.2h内该酶对魔芋胶有较强的水解作用,2h后作用明显减弱.三段酶法水解魔芋胶效果较好.以正交实验优化酶解条件为:40℃、pH 5.0~7.0时,以50u/g的酶量作用于1.0~1.5/﹪的魔芋胶1.0h,可以得到水解率25﹪左右的魔芋葡萄甘露低聚糖浆.酶解产物经纸层析、薄层层析HPLC检测为单糖和系列低聚糖.40℃、以150u/g的酶量水解20﹪的魔芋胶2.0h,可得高浓度低聚糖浆.酶解产物经硅藻土过滤、活性炭脱色、离子交换脱盐、浓缩、过滤除菌后获得无色透明、口味纯正的高浓度糖浆.HPLC检测结果显示:糖浆中低聚糖相对含量达90﹪以上.该糖浆对双歧杆菌具有显著的促生长作用.分别以亚硝基胍、氨苄青霉素和利福平诱变选育Bacillus sp.M<,50>,筛选到2株酶活力高于出发菌株30﹪左右的突变株.
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