Tautomycetin (TMC)是一种具有抗真菌、抗肿瘤和免疫抑制剂作用的聚酮化合物,由一个DAM的二烷基马来酸酐通过酯键与一条聚酮链键合而成。TMC的基因簇包含六个基因用于合成DAM结构,两个I型聚酮合成酶(PKS)用于合成聚酮链,同时包含可能的后修饰基因对聚酮链进行后修饰。TMC是特异的蛋白磷酸酶PP1抑制剂,并发现其抑制肿瘤细胞生长的作用,因此可以作为潜在的抗肿瘤药物。本文首先构建了可能参与DAM六个合成基因的表达载体,成功构建了含有DAM全部合成基因的表达载体和各自的表达载体。通过表达条件的优化,得到了其中五个基因的表达产物。选取其中羟化酶基因作为主要研究对象,经过测序确定其序列和读码框的正确性后,诱导表达,得到可溶表达产物后,用已知的三种底物进行体外酶活性的测定,并结合实验室中已知结果推断3’位置羟化时间。本研究将为进一步阐明TMC DAM的生物合成机制,研究其构效关系奠定基础。同时为今后异源表达TMC提供了前提和基础。