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洛铂是由两个非对映异构体组成的混合物,属于第三代铂类抗肿瘤药物,对于许多种类的肿瘤具有明显的抑制作用。Acquity UPC2系统结合了超临界流体色谱的优势和超高效液相色谱(UPLC)的技术优点,采用超临界流体作为流动相,超临界流体具有黏度低、传质性能好、分离效率高、绿色环保等优势,通过在流动相中加入甲醇等极性溶剂和其它极性添加剂(水、酸和碱等),使流动相的极性范围变宽,能够分离更大极性范围内的化合物。同时,该系统基于UPLC的技术平台,使得仪器具有更好的可操控性能、精密度和灵敏度。本研究创新性地建立了一种简单、快速且灵敏度高的用于同时定量大鼠血浆中洛铂两个非对映异构体的超临界流体色谱-串联质谱(SFC-MS/MS)分析方法,可用于研究洛铂两个非对映异构体是否具有药代动力学上的立体选择性。对大鼠血浆样品利用甲醇进行简单的蛋白沉淀处理后,洛铂两个非对映异构体在Acquity UPC2系统中实现了良好的分离,色谱柱为Chiralcel OZ-RH柱,流动相为二氧化碳-甲醇(65:35,v/v),流速为4.0mL/min,柱温控制在40℃,每个样品的分析时间为6min。用于定量洛铂两个非对映异构体的线性范围均为25-15000 ng/mL,定量下限均为25 ng/mL,大鼠血浆样品的用量为100 μL。该分析方法的日内和日间精密度均在11.8%以内,准确度在理论值偏差的4.5%以内。大鼠尾静脉注射7.6 mg/kg洛铂后,应用该方法进行两个非对映异构体的药代动力学研究。根据非房室模型计算出 了包括 AUC0-t,AUC0-∞ Cmax,C0,t1/2,Vd,CL 等药代参数,LP-D1 分别为 634 ±120 μg/mL·min,638 ± 121μg/mL·min,11.6 ± 1.1 μμg/mL,14.6 ± 1.4 μg/mL,65.7± 9.6 min,0.1 ± 0.0 L,1.3 ± 0.6 mL/min;LP-D2 分别为 576 ± 112 μg/mL·min,581±113μg/mL·min,10.7±1.0μg/mL,13.3±1.3μg/mL,74.8±14.9min,0.2±0.1 L,1.3 ± 0.6 mL/min。经统计分析表明洛铂两个非对映异构体在大鼠体内没有显著的药代动力学立体选择性。本课题同时还研究了洛铂体外对人肝脏细胞色素P450酶1A2,3A4,2C9,2C19,2D6,2E1,2A6,2B6等8种亚型的抑制作用。采用的研究方法为体外探针孵育法,在体外用人肝微粒体孵育了 8种P450酶亚型的特异性探针底物,然后通过LC-MS/MS定量生成的代谢产物,根据生成代谢产物的量来评估洛铂对各P450酶亚型的酶活性的影响。研究结果表明,在治疗剂量下洛铂对人肝脏细胞色素P450酶2A6,3A4,2B6,2C9,2C19,2D6,2E1亚型无抑制作用,对1A2有轻微的抑制作用,抑制率低于20%。