糖尿病小鼠牙齿伸长过程中Ⅰ型胶原蛋白的表达及成骨细胞的变化

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nixiangtama
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目的:在糖尿病小鼠模型中观察无对颌磨牙的牙齿牙合向伸长过程中成骨细胞的分化及Ⅰ型胶原蛋白在基因水平的表达,探究无对颌牙齿牙合向伸长运动的机制。方法:将C57BL/6J体重在20g-22g的雄性小鼠65只,随机分组分为实验组和对照组,实验组40只,正常对照组25只。实验组注射链脲佐菌素建立糖尿病模型,对照组注射柠檬酸钠溶液作为空白对照。造模成功后实验组随机选出25只小鼠组成糖尿病组小鼠,分别拔除糖尿病组及对照组小鼠右侧上颌磨牙,再将两组小鼠随机分为5个亚组,每组5只并于0、3、6、9、12天分别处死,提取其右侧下颌骨。每组中随机选取3只小鼠的下颌骨在-80℃冰箱中冷藏、研磨,通过RT-qPCR观察糖尿病组及对照组中Ⅰ型胶原蛋白表达的差异;剩余2只小鼠的下颌骨进行碱性磷酸酶染色观察拔牙后不同时间点糖尿病组以及对照组小鼠下颌骨中成骨细胞数目的差异。结果:模型的建立实验组小鼠在注射STZ后体重随着时间的推移不断下降(P<0.05),但下降趋势逐渐平缓;血糖在0-3周上升(P<0.05),但在第4周检测时略有下降(P<0.05),且小鼠精神较之对照组萎靡,行动迟缓,毛色发暗,多饮,多食,多尿,对照组小鼠血糖始终处于正常范围。形态学观察碱性磷酸酶染色结果:0天、3天、6天、9天、12天五个时间段成骨细胞阳性染色呈增多趋势,但糖尿病组染色较浅,阳性细胞较对照组少(P<0.05);Ⅰ型胶原蛋白的相对表达量实时荧光定量PCR结果:0天、3天、6天、9天、12天五个时间段的Ⅰ型胶原蛋白相对表达量逐渐增多,糖尿病组Ⅰ型胶原蛋白表达量少于对照组,且差异具有统计学意义(P<0.05)结论:1、糖尿病组小鼠与对照组小鼠在0天到12天时碱性磷酸酶染色阳性的细胞数目均逐渐增多,但糖尿病小鼠的碱性磷酸酶阳性细胞数目较正常组少且染色较浅,提示血糖升高会导致骨形成相对受阻,成骨细胞形成增幅降低是造成糖尿病小鼠牙齿伸长低于对照组的原因之一。2、相对实时荧光定量PCR实验中糖尿病组及对照组0天至12天组的Ⅰ型胶原蛋白表达量有增加趋势,但糖尿病组表达量低于对照组小鼠,提示Ⅰ型胶原蛋白在牙齿伸长过程中起到一定作用,但糖尿病会阻碍Ⅰ型胶原蛋白的表达进而影响牙齿的伸长。
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