论文部分内容阅读
目的:男性不育的发病率较高,精液体积作为评估男性生育能力的指标常常被忽视。低雄激素水平的男性常伴精液量减少和不育,但低雄激素水平与精液体积减少的关系及机制未见报道。水通道蛋白(AQPs)是一类促进水和许多小溶质跨膜运动的膜蛋白。精液主要由精囊腺和前列腺产生,精液的产生可能是由许多相关的机制介导的液体的分泌。本研究目的是探讨雄激素水平对大鼠精液量的影响及精囊腺和前列腺中AQPs表达的变化,以阐明雄激素对大鼠精液量的影响机制,从而为临床上精液量减少的低雄激素水平患者提供治疗的靶点。 方法:将18只健康的8周龄雄性SD大鼠随机分成对照组、去势组和去势+睾酮替代组,喂养4周后测量各组大鼠的体重及血清睾酮水平。用2%的戊巴比妥钠以40 mg/kg腹腔注射,麻醉动物,取下腹正中切口,结扎膀胱颈部及双侧精囊输出管,暴露前列腺后外侧的盆神经并电刺激,用干燥的棉签置于尿道口前收集前列腺液。摘取结扎好的精囊腺,剪掉线结,收集精囊液。将取下的精囊和前列腺组织,通过免疫组织化学和免疫印迹检测方法来确定精囊腺和前列腺组织中AQP0、AQP1、AQP4、AQP5、AQP6和AQP8的表达情况。 结果:去势组大鼠血清睾酮水平(21.77±7.41.ng/dl)明显低于对照组(619.17±145.95 ng/dl)(P<0.05)和去势±睾酮替代组(591.35±105.91 ng/dl)(P<0.05)。去势组大鼠体重(313±22 g)与对照组(321±14g)和去势+睾酮替代组(306±18 g)相比未见明显差异。电刺激盆神经后,去势大鼠精囊腺分泌液重量/相应腺体重量(3.96±1.07%)均明显低于对照组(56.37±3.83%)(P<0.05)和去势+睾酮替代组(52.51±4.12%)(P<0.05)。去势大鼠前列腺分泌液重量/相应腺体重量(1.34±0.09%)均明显低于对照组(2.30±0.23%)(P<0.05)和去势+睾酮替代组(2.22±0.31%)(P<0.05)。免疫组织化学检测显示,AQP0、4、5、6和8主要在大鼠精囊腺上皮细胞和前列腺腺上皮细胞的胞浆及包膜上表达;AQP1主要在精囊腺腺上皮细胞的胞浆、胞膜和血管内皮细胞上表达,在前列腺腺上皮周围的血管内皮细胞上表达。免疫印迹检测显示,AQP0、AQP1、AQP4、AQP5、AQP6和AQP8在去势大鼠精囊中表达的相对灰度值(分别为61.33±11.58、53.80±8.38、27.27±9.02、44.80±11.74、33.72±9.02和37.04±8.23)明显低于对照组(分别为93.57±11.10、89.95±13.02、69.05±12.74、90.47±10.61、77.34±13.55和87.55±11.66)(P<0.05)和去势+睾酮替代组(分别为88.54±9.77、85.28±12.35、62.00±10.40、82.53±8.19、71.72±11.55和81.38±11.8)(P<0.05)。前列腺中AQP0、AQP1、AQP4、AQP5、AQP6和AQP8的表达水平,去势组(分别为46.56±8.49、32.02±7.16、33.58±7.15、37.23±4.95、24.77±6.25和26.21±6.44)明显低于对照组(分别为88.28±13.45、86.12±10.73、93.40±10.49、80.09±9.50、63.55±10.66和86.55±10.66)(P<0.05)和去势+睾酮替代组(分别为83.56±9.15、78.72±7.99、84.8±7.22、75.60±8.45、60.71±9.06和80.05±8.76)(P<0.05)。 结论:电刺激盆神经后发现,去势大鼠精囊腺及前列腺分泌液体量显著少于正常大鼠。当去势大鼠补充生理剂量的雄激素后,大鼠精囊腺及前列腺分泌液量又重新恢复至正常水平,说明低雄激素水平引起精囊液和前列腺液分泌量显著减少,同时低雄激素水平引起精囊腺和前列腺上皮细胞的胞浆及包膜上AQP0、AQP4、AQP5、AQP6和AQP8表达减少,精囊腺腺上皮细胞的胞浆、胞膜和血管内皮细胞上AQP1表达减少,以及前列腺腺周围血管内皮细胞上AQP1表达表达水平显著减少。低雄激素水平可能通过影响精囊腺和前列腺中AQP0、AQP1、AQP4、AQP5、AQP6或AQP8的表达引起精囊液和前列腺液分泌量的减少。