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试验一:酯化葡甘露聚糖在体外对玉米赤霉烯酮吸附能力的测定
应用本实验室合成的不同浓度的酯化葡甘露聚糖(EGM)在水相中对500ng/mL的玉米赤霉烯酮(ZEN)溶液进行吸附试验。第1组,第2组为对照组,不添加EGM,第3-7组分别加入0.05%、0.075%、0.1%、0.125%和0.15%的EGM,并调节pH为2.5。第8-12组并分别加入0.05%、0.075%、0.1%、0.125%和0.15%的EGM,并调节pH为6.5。37±0.5℃恒温振荡器300r/min吸附反应12h,5000r/main离心10min,分别取上清液常温保存检测ZEN含量,研究EGM在体外对ZEN的吸附能力。结果表明合成的酯化葡甘露聚糖对ZEN具有良好的吸附能力,当pH在6.5,EGM的浓度达到0.1%的时候,吸附效果最好,最高吸附率达到78.62%。
试验二:饲料中添加酯化葡甘露聚糖对小鼠玉米赤霉烯酮中毒的预防作用
选择126只18-22g的健康昆明种小白鼠,随机分为6组,第1组为空白对照组,饲喂基础日粮;第2组为阳性对照组,在基础日粮中添加ZEN10mg/kg;第3-6组基础日粮中添加ZEN10mg/kg,再分别添加0.05%、0.1%、0.2%和0.3%的EGM。研究ZEN染毒饲料中添加EGM对小鼠生长性能、子宫变化、免疫指标及血液生化指标的影响。结果表明,试验至30d,第1组、第4组、第5组、第6组小鼠子宫指数,血清中MDA含量、AKP活性、AST活性和ALT活性显著低于第2组和第3组(P<0.05);第1组、第4组、第5组、第6组小鼠体重、血清T-AOC、SOD活性、白蛋白含量、小鼠脾脏指数、胸腺指数、小鼠外周血淋巴细胞转化率均显著高于第2组(P<0.05);第1组、第4组、第5组、第6组之间各项指标差异不显著(P>0.05)。病理学观察表明,第2组21只小鼠中有9只小鼠的子宫肿大明显,第3组21只小鼠有3只小鼠的子宫肿大明显,其他各组小鼠均无子宫肿大现象。由此表明,EGM能很好地吸附ZEN,减轻毒素对小鼠的损伤,在饲料中的最适添加剂量为0.1%。
试验三:玉米赤霉烯酮染毒培养基中添加酯化葡甘露聚糖对肝细胞生长和代谢的影响
本试验旨在研究在加入玉米赤霉烯酮(ZEN)的培养基中添加酯化葡甘露聚糖(EGM)对肝细胞生长及代谢的影响,探讨EGM对ZEN的吸附能力。在96孔细胞培养板的18个培养孔内加入150μL含2.0×106个/mL肝细胞的RPMI1640完全培养液,为第1组,即空白对照组;在18个培养孔内加入150μL含2.0×106个/mL肝细胞、0.5μg/mLZEN的RPMI1640培养液,为第2组;在18个培养孔内加入150μL含2.0×106个/mL肝细胞、0.5μg/mLZEN和0.1%EGM的RPMI1640培养液,为第3组。结果显示,第3组肝细胞存活率、培养基质中白蛋白含量和总抗氧化能力高于第2组,差异有显著有意义(P<0.05)。第1组培养基质中白蛋白含量高于第3组,差异有显著有意义(P<0.05),笫1组和第3组培养基质中白蛋白含量和总抗氧化能力差异不显著(P>0.05)。试验表明,EGM能有效吸附ZEN,减轻ZEN对小鼠肝细胞的毒性作用。