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胚胎干细胞(embryonicstemcell，ES)是一种将着床前胚胎的内细胞团(innercellmass，ICM)在体外培养而成的细胞，目前，仅小鼠和大鼠ES细胞系能在嵌合体中进入生殖嵴并形成生殖细胞，而其他哺乳动物，都没有建立能形成生殖细胞的ES细胞系。我们运用全新的培养体系对兔、大鼠和牛ES细胞进行建系研究，以及研究小鼠ES细胞的悬浮培养体系，建立了兔、大鼠、牛和小鼠胚胎干细胞系，并经过长期培养仍保持发育的多能性。
将兔、大鼠和牛的囊胚在体外机械法分离ICM，在各自的培养体系中培养，用机械法传代，将兔ES细胞培养到4代，将大鼠和牛ES细胞培养到10代和7代，均保持典型的ES细胞形态，经碱性磷酸酶(alkalinephosphatase，AKP)染色为阳性；R1系mES细胞在培养液A中能够快速增殖，AKP染色呈阳性，并保持未分化状态而传20代以上，注射到nod-scid小鼠后腿肌肉，成功长出畸胎瘤。因此得出：
兔ES细胞在灭活的胎鼠内胚层细胞作饲养层，78％D-MEM/F-12+20％KnockoutSR+2mM/L-Glutamine+l％MEMNAA+0.1mM/Lβ-mercaptoethanol+8ng/mlhrbFGF+2％CEE作培养基所构成的体系中，能很好的被分离培养，小鼠内胚层细胞和CEE联合使用能很好的支持原代兔ES细胞的生长。
同样以86％DMEM+10％SR+3％CEE+1％MEMNAA+2mmol/LL-Glutamine+0.1mmool/Lβ-mercaptoethanol为培养基，大鼠ES细胞在灭活的3T3细胞作饲养层的体系中，保持未分化状态传到10代以上；而牛ES细胞在原饲养层，保持未分化状态到7代左右。
在15％FBS+1000IUmLIF+0.2mg/mldispase+84％DMEM/F12+1％MEMNAA+2mmol/LL-Glutamine+0.1mmol/Lβ-mercaptoethanol培养基中悬浮培养小鼠ES细胞可在体外维持不分化状态，能够快速增殖。