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目的：白念珠菌所致深部感染的发病率明显增高，严重病例难以治疗，死亡率高，部分病例与白念珠菌在体内易形成生物被膜有关。本研究主要对AAF1基因在形成生物被膜中的作用和可能机制进行探讨。方法：首先使用基因拼接的方法构建质粒pHS1-U3du3-HS2和自主表达AAF1基因的质粒pHS1-GAAU3-HS2。以CAI4为参考菌株(AAF1／AAF1)，采用“Ura-blaster”技术，使用质粒pHS1-U3du3-HS2转化结合5-氟乳清酸(5-FOA)压力筛选，将AAF1基因从基因组完全剔除，然后再转入自主表达质粒pHS1-GAAU3-HS2，构建自主表达菌株。通过表型鉴定和不同引物进行PCR扩增鉴定，构建出实验所需的重组菌株。使用体外形成生物被膜模型和动物模型，通过倒置显微镜和扫描电镜比较AAF1基因缺失菌株、AAF1自主表达菌株和参考菌株在形成生物被膜时的形态学差异。最后使用实时定量逆转录PCR方法检测AAF1基因缺失菌株和AAF1基因自主表达菌株两者的HWP1基因和ALS3基因表达水平，并对差异进行比较。结果：通过基因拼接成功构建了质粒pHS1-U3du3-HS2和pHS1-GAAU3-HS2。成功地将AAF1基因从基因组剔除，构建出菌株M2-2(△aaf1／△aaf1)，构建出自主表达AAF1基因的菌株M3(△aaf1／△aaf1+pGAP-AAF1)，并通过免疫印迹鉴定。形态学观察不同菌株体外形成的白念珠菌生物被膜发现：菌株M2-2(△aaf1／△aaf1)仅呈稀疏粘附，而菌株M3(△aaf1／△aaf1+pGAP-AAF1)和参考菌株CAI4(AAF1／AAF1)均能形成典型的生物被膜。在白念珠菌形成生物被膜的动物模型上，扫描电镜下显示M2-2(△aaf1／△aaf1)难以形成生物被膜，而M3(△aaf1／△aaf1+pGAP-AAF1)和参考菌株CAI4均形成成熟的生物被膜。实时定量逆转录PCR检测发现：在ALS3基因的表达水平上，M3是M2-2的15.63492倍；在HWP1基因的表达水平上，M3是M2-2的8.817685倍。结论：利用构建出的质粒pHS1-U3du3-HS2和自主表达AAF1基因的质粒pHS1-GAAU3-HS2，成功地构建出AAF1基因完全剔除菌株M2-2(△aaf1／△aaf1)和自主表达AAF1基因的菌株M3(△aaf1／△aaf1+pGAP-AAF1)；体内外的实验表明AAF1基因在白念珠菌形成生物被膜过程中起着重要的作用；这种作用可能是通过细胞壁蛋白Als3和Hwp1来实现的。