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研究目的:随着新药研发力度的不断加大,如何在早期发现药物的潜在毒性,改良药物,避免临床风险一直是研发人员的关注要点。本研究通过利用具有生殖毒性的抗肿瘤药物造模,研究在不同程度生殖系统损伤下钙离子精子结合蛋白1和精核蛋白2的变化情况,与目前常用的雄性生殖系统损伤检测指标相比较,探究其早期预测能力。实验方法:将SD大鼠随机分为空白对照组、盐酸多柔比星7mg/m~2组和14mg/m~2组,8只/组,每隔21天尾静脉注射给药一次,连续给药3个周期,并于最后一次给药一周后剖杀。将SD大鼠分为DMSO组、白消安组1.0mg/kg组和15mg/kg组,5只/组,腹腔注射给药一次,于一个月后剖杀。检测指标包括:体重、双侧睾丸重量、横径、双侧附睾重量、附睾尾精子数,精子活力(Motility、progressive、VAP、VSL、VCL、ALH、BCF、STR、LIN)、血清睾酮含量和睾丸组织病理学检查,QRT-PCR检测睾丸组织中CABS1和SP-2 m RNA的表达。实验结果:1.在盐酸多柔比星7mg/m~2组中,在常规检测指标中,除睾丸的绝对和相对重量、左侧横径减小外,其他指标:体重、精子计数、活力(Motility)、向前活动(progressive)、经线速率(VAP)、前向活动速率(VSL)、轨迹速度(VCL)、精子头侧向移位(ALH)、鞭打频率(BCF)、前向性(STR)和直线性(LIN)、睾丸组织病理结构和血清睾酮浓度均没有发现明显改变。睾丸组织中CABS1m RNA的表达量明显下调,SP-2mRNA也有下调的趋势。2.在盐酸多柔比星14mg/m~2组中,常规的检测指标中,大鼠体重下降,睾丸的绝对和相对重量、双侧横径,及附睾的绝对和相对重量明显降低,精子计数明显减少,精子活力明显下降,睾丸重度萎缩,血清睾酮含量无统计学差异。睾丸组织中CABS1mRNA和SP-2mRNA的表达量也明显下调。3.在白消安1.0mg/kg组中,在常规的检测指标,如大鼠体重、睾丸的绝对和相对重量、双侧横径、附睾的绝对和相对重量、精子计数、Motility、progressive、VAP、VSL、VCL、ALH、BCF、STR、LIN、睾丸组织病理结构和血清睾酮含量,都没有明显变化下,睾丸组织中的CABS1mRNA和SP-2mRNA表达量出现下调。4.在白消安15.0mg/kg组中,除了大鼠睾丸的绝对和相对重量减轻、双侧横径减小外,其余指标:附睾的绝对和相对重量、精子计数、Motility、progressive、VAP、VSL、VCL、ALH、BCF、STR、LIN、睾丸组织病理检查和血清睾酮含量,并没有明显改变。而在睾丸组织中CABS1mRNA和SP-2mRNA的表达量出现明显下调。结论:1.每3周尾静脉注射盐酸多柔比星一次,连续注射3个周期和单次腹腔注射白消安,均造成雄性SD大鼠生殖系统的损伤。2.在雄性生殖系统损伤模型中,当常规生殖毒性检测指标未发生变化时,CABS1和SP-2的表达量已出现下调,当常规生殖毒性检测指标出现不同程度变化时,CABS1和SP-2的表达量已明显下调。3.CABS1和SP-2具有成为雄性生殖系统损伤早期生物标志物的潜力。