【摘 要】
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目的:通过MNNG联合饱和NaCl建立慢性萎缩性胃炎模型,确定最佳成模时间,并观察胃黏膜血液微循环和COX-2/HIF-1α/VEGF信号通路的动态变化,探索CAG“气虚血瘀”可能的病理机制。并基于胃黏膜微循环和COX-2/HIF-1α/VEGF信号通路变化,探讨“益气活血”方胃祺饮治疗CAG的作用机制。方法:1.45只雄性Wistar大鼠随机分为正常组10只,模型组35只。MNNG联合饱和NaC
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目的:通过MNNG联合饱和NaCl建立慢性萎缩性胃炎模型,确定最佳成模时间,并观察胃黏膜血液微循环和COX-2/HIF-1α/VEGF信号通路的动态变化,探索CAG“气虚血瘀”可能的病理机制。并基于胃黏膜微循环和COX-2/HIF-1α/VEGF信号通路变化,探讨“益气活血”方胃祺饮治疗CAG的作用机制。方法:1.45只雄性Wistar大鼠随机分为正常组10只,模型组35只。MNNG联合饱和NaCl灌胃建立CAG动物模型,模型组动物分别于第5周末、10周末、15周末、20周末、25周末、30周末、35周末各处理5只。利用激光多普勒血流仪检测胃黏膜血流量。胃组织行HE和AB-PAS染色,以观察各时期胃黏膜病理改变。Western Blot检测各时期胃组织COX-2、HIF-1α、VEGFR1蛋白表达。QPCR检测各时期胃组织COX-2、HIF-1α、VEGF、VEGFR1基因表达。2.48只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、胃祺饮高剂量组(4 g/kg)、胃祺饮中剂量组(2 g/kg)、胃祺饮低剂量组(1 g/kg)和叶酸组,每组8只。MNNG联合饱和NaCl建立CAG模型的同时自第16周起给予胃祺饮、叶酸治疗25周。造模给药结束后,激光多普勒血流仪检测各组胃黏膜血流量。各组胃组织进行HE染色和AB-PAS染色观察胃黏膜病理改变。Western Blot检测各组胃组织COX-2、HIF-1α、VEGFR1蛋白表达。QPCR检测各组胃组织COX-2、HIF-1α、VEGF、VEGFR1基因表达。结果:1.通过MNNG合并饱和NaCl制备CAG大鼠模型,造模15周,即出现胃黏膜局部血流速度下降,但是此时并无慢性萎缩性胃炎的病理变化;造模第25周,出现HIF-1 α、COX-2的蛋白表达增加,且胃组织病理出现轻度萎缩变化,HIF-1 α、COX-2、VEGF和VEGFR1的基因水平呈现高表达;至造模35周病理染色结果显示胃黏膜出现中重度萎缩及肠化生,且COX-2、HIF-1α和VEGFR1蛋白过表达,HIF-1α、COX-2、VEGF和VEGFR1通路相关基因均高表达。2.经胃祺饮给药后,与模型组相比,胃祺饮组和叶酸组均能够显著增加慢性萎缩性胃炎模型大鼠胃黏膜局部血流速度,有效改善胃黏膜的萎缩和肠化生情况,抑制 HIF-1α、COX-2、VEGFR1 的蛋白表达,降低 HIF-1α、COX-2、VEGF、VEGFR1的基因表达水平。结论:MNNG联合饱和NaCl灌胃制备CAG动物模型的最佳造模时间是35周,胃黏膜血液微循环障碍和COX-2/HIF-1α/VEGF通路异常与“气虚血瘀”的发病机制有关。胃祺饮可改善胃黏膜微循环障碍并通过调控COX-2/HIF-1α/VEGF通路来达到治疗CAG的作用。
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