目的通过与氟尿嘧啶的对比,观察田基黄提取液对H22荷瘤小鼠的肿瘤生长、免疫器官功能以及生存质量的影响,研究田基黄对小鼠肝癌的治疗作用及其对氟尿嘧啶的减毒增效作用,采用实时荧光定量PCR基因芯片技术研究H22肝癌移植瘤小鼠肝脏组织的肿瘤耐药与药物代谢相关基因表达水平,筛选出差异表达的基因并分析其意义。方法1、单用田基黄提取液对H22荷瘤小鼠肝癌的抗肿瘤作用的实验分组：清洁级ICR小鼠,建立荷H22型肝癌小鼠移植瘤模型,随机分成8组：模型组,给予生理盐水灌胃；5-FU组,给予5-FU腹腔注射；田基黄蒸馏水提取液、田基黄95%乙醇提取液高、中、低剂量组,给予各提取液灌胃。2、田基黄提取液联合氟尿嘧啶对H22荷瘤小鼠肝癌的抗肿瘤作用的实验分组：清洁级ICR小鼠,建立荷H22型肝癌小鼠移植瘤模型,随机分成6组：模型组,给予生理盐水灌胃；5-FU组,给予5-FU腹腔注射；田基黄蒸馏水提取液、95%乙醇提取液有效剂量组(在单用田基黄治疗的实验基础上,筛选出实验组中抑瘤率最高的田基黄提取液剂量为有效剂量),给予相应提取液灌胃；田基黄蒸馏水提取液、95%乙醇提取液有效剂量联合氟尿嘧啶组,给予5-FU腹腔注射及提取液灌胃；同时建立一个正常对照组,给予生理盐水灌胃。每日1次,连续用药10天后停药,称取小鼠体质量,目内眦静脉丛取血后处死并立即摘取肝脏,剥离瘤块、脾脏和胸腺后称其质量。计算体重变化、肿瘤抑制率、胸腺指数、脾指数,外周血白细胞计数,常规制备肿瘤组织病理切片HE染色,光镜观察肿瘤组织病理变化。所有数据采用SPSS16.0统计软件包分析。3、H22肝癌荷瘤小鼠的肿瘤药物耐药与代谢相关基因表达的检测：取正常组、模型组、5-FU组、田基黄提取液有效剂量组、田基黄提取液有效剂量联合5-FU组共5组.的小鼠肝脏组织,常规提取RNA并逆转录成cDNA后,采用实时荧光定量PCR基因芯片技术检测基因芯片上所固定的84个小鼠肿瘤药物耐药与代谢相关基因的荧光强度,计算其基因表达差异程度。实时定量PCR Array的数据分析采用△ΔCt方法。结果]、田基黄治疗后小鼠体重呈增长趋势,各田基黄治疗组的体重增加明显高于5-FU组(P<0.01),田基黄水提液高、中、低剂量组体重增加高于模型组,田基黄联合5-FU组小鼠体重明显高于单用5-FU化疗组(P<0.01)。田基黄水提低剂量组、醇提中剂量组小鼠的活动度、精神状态、食量、死亡率等方面较模型组、化疗组表现出一定的优势。2、各治疗组平均瘤重比模型组低(P<0.05),5-FU组的瘤重又明显低于田基黄提取液治疗组(P<0.01)。田基黄蒸馏水提取液抑瘤率为18.25%-43.27%,田基黄95%乙醇提取液抑瘤率为15.07%-40.98%；各田基黄提取液联合5-FU组的平均瘤重明显低于单用田基黄提取液的治疗组,稍高于单用5-FU组。3、田基黄提取液各治疗组小鼠的胸腺指数、脾脏指数明显高于5-FU组(P<0.01),5-FU组的胸腺指数、脾脏指数明显低于模型组,且各田基黄提取液治疗组的小鼠脾指数明显高于模型组；田基黄提取液联合5-FU组的胸腺指数、脾指数明显高于单用5-FU组(P<0.01)。4、单用田基黄提取液治疗组的外周血白细胞计数明显高于5-FU组(P<0.01)；联合给药组的白细胞计数稍高于单用5-FU组。5、光镜观察发现模型组可见肿瘤细胞异型性明显,核浆比例大,核仁明显,较多病理性核分裂像；化疗组可见肿瘤细胞大片坏死,大量凋亡细胞；田基黄提取液治疗组可见肿瘤细胞坏死少于化疗组；田基黄提取液联合化疗组可见明显的肿瘤细胞大片坏死。6、PCR基因芯片技术检测正常组、模型组、5-FU组、田基黄水提液组、田基黄水提液联合5-FU组荷瘤小鼠肝脏组织的基因表达,筛选出大量肿瘤药物耐药与代谢相关基因的差异表达基因,包括经典的耐药基因MDR、MRP以及药物代谢基因CYP家族,GST等。模型组与正常组比较有30个差异基因表达；5-’FU组与正常组比较差异表达的基因有28个；5-FU组与模型组比较有10个差异基因表达；田基黄水提低剂量组与模型组比较有7个差异基因表达；田基黄水提低剂量联合5-FU组与模型组比较有10个差异基因表达。结论1、田基黄提取液对小鼠H22肝癌移植瘤的生长有不同程度的抑制作用,同时能增加荷瘤小鼠体重、改善生存质量、增强机体免疫功能,对氟尿嘧啶的增效作用不明显,但对其有一定程度的减毒作用,能作为一种抗肿瘤药物进行深入的研究。2、PCR基因芯片技术筛选出肝脏组织肿瘤药物耐药和代谢相关基因差异表达的基因,表明正常组织与肿瘤组织的某些耐药基因变化有着相关性,为耐药机制的研究提供新的研究思路,田基黄对基因表达的影响也为其抗肝癌作用的分子生物学机制研究提供依据。