【摘 要】
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目的(1)明确花旗松素在体外对破骨细胞生成和功能的影响。(2)探讨花旗松素在体内对卵巢切除小鼠骨丢失及其他方面的影响。方法(1)体外实验:用RANKL分别诱导细胞系RAW 264.7和
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目的(1)明确花旗松素在体外对破骨细胞生成和功能的影响。(2)探讨花旗松素在体内对卵巢切除小鼠骨丢失及其他方面的影响。方法(1)体外实验:用RANKL分别诱导细胞系RAW 264.7和小鼠原代骨髓单核细胞(加入巨噬细胞集落形成因子M-CSF)向破骨细胞分化,并加入不同浓度的花旗松素予以干预。通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、抗酒石酸酸性磷酸酶活性检测、骨吸收实验、细胞骨架纤维形肌动蛋白(F-Actin)环染色、破骨细胞特异性基因和蛋白检测等探讨花旗松素对破骨形成和功能的影响。(2)体内实验:通过切除C57/BL6雌鼠卵巢建立骨质疏松动物模型,实验组给予腹腔注射花旗松素,对照组给予相同剂量的盐水。实验终点通过对各组小鼠骨组织进行切片染色和μ-CT扫描进行形态学和组织学评估,并通过酶联免疫吸附实验检测各组小鼠外周血清中炎性因子水平,探讨花旗松素在体内对卵巢切除小鼠骨丢失及其他影响。结果在体外实验中,我们发现花旗松素能够抑制破骨细胞形成和骨吸收功能;抑制NF-κB、C-Fos和MAPK的激活,并降低破骨细胞特异性基因的表达,包括TRAP、MMP-9、Cathepsin K、C-Fos、NFATc1和RANK;抑制转录因子NF-κB和AP-1的核转录;阻止活性氧(ROS)的产生。上述作用机制可能通过抑制NF-κB、MAPKs和AKT蛋白通路起作用。此外,在体内实验中,我们发现花旗松素可以抑制破骨细胞活性和降低体内血清中TNF-α、IL-1β、IL-6和RANKL的水平,减轻了卵巢切除诱导的骨丢失。结论(1)花旗松素抑制破骨细胞生成和功能,缓解小鼠卵巢切除所致的骨丢失。(2)花旗松素可能成为一种治疗破骨细胞相关疾病的新策略。
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