碱性成纤维细胞生长因子对大鼠牙脱位延迟再植的影响

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目的:本试验采用动物实验的方法,探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对大鼠牙脱位后延迟再植牙周膜愈合的影响。方法:由河北医科大学动物实验中心提供的口腔卫生良好,无龋齿及牙周炎,体重250-300g,雄性Wistar大鼠作为实验对象,共32只。将32只雄性大鼠常规定量喂养,术前12h禁食水。准确称量动物体重,用10%水合氯醛(3ml/kg)腹腔注射麻醉,仰卧固定,无菌拔除右上中切牙。将拔除的牙完全随机分成四组(每组8颗):A组(阴性对照组)、B组(阳性对照组)、C组(bFGF组)、D组(bFGF+bio-oss骨粉组)。A组:不做任何处理,即刻再植;B组、C组、D组:将脱位牙搁置在经高温高压消毒的金属托盘自然干燥1h,体外行倒根充,玻璃离子根尖封闭(这些操作在6min内完成),B组根尖封闭后再植。牙根处理:C组8颗牙牙根表面直接涂抹bFGF糊剂;D组8颗牙牙根表面涂抹bFGF+Bio-oss骨粉糊剂。牙槽窝处理:脱位牙再植前,用5ml生理盐水冲洗牙槽窝。C组牙槽窝内涂布bFGF糊剂,D组牙槽窝内涂布bFGF+Bio-oss骨粉糊剂。将C组、D组牙齿用拔牙钳植入牙槽窝。牙再植后,流动树脂夹板固定方法进行固定,均匀磨除右上中切牙切端约2mm以降低咬合。术后7d半流食,术后无任何异常活动,进食正常。肌肉注射20000单位青霉素/次,1次/日,共7天。7天后用10%水合氯醛以3ml/kg腹腔注射局麻下去除树脂夹板。术后8w以过量水合氯醛处死动物,切取包括右上中切牙在内的骨块,用生理盐水冲洗,10%福尔马林固定,pH6.9的4%EDTA脱钙,石蜡包埋,沿与牙体长轴垂直的方向切片,伊红-苏木精染色。组织学观察,在盖玻片上画“米”字形八等份线条,将此盖玻片覆盖在已做封闭处理的组织片上,光学显微镜观察。盖玻片上“米”字形线条与牙根平面有8个交点,此即为每张切片的观察记录点。参考Andreasen的方法,牙再植的愈合可分为3种类型,1)牙骨质愈合(CH):即牙骨质完整,周围组织无炎症,包括牙周膜愈合以及牙骨质无缺损而牙周膜被增生的牙槽骨所替代(简称牙周膜骨替代)两种情况;2)牙根替代性吸收(RR);3)牙根炎症性吸收(IR)。记录每个观察点所属愈合类型,分类计数。分别计算出每组牙三种愈合方式的平均百分比,比较各组间每种愈合方式平均百分比有无差别。采用Kruskal-WallisTest检验,对四组数据愈合百分比进行总体分析,用Mann-WhitneyU法进行组间两两比较,以上数据分析均采用SPSS13.0统计软件完成,检验水准取双侧α=0.05,P≤0.05有统计学意义。结果:1HE染色图片从切片上可以看到A组(阴性对照组)再植后牙周膜纤维再附着,牙根表面无替代性吸收和炎症性吸收;B组(阳性对照组)再植后牙根表面存在大面积炎症性吸收,有的吸收区可见牙槽骨形成和少量牙骨质修复;C组(bFGF组)再植后牙根表面浅凹状吸收,吸收区存在修复性牙骨质,新生骨组织替代正常牙周组织,可见到少量炎细胞浸润和牙周结缔组织再附着;D组(bFGF+Bio-oss骨粉组)再植后牙根表面存在牙周膜纤维再附着,根面牙骨质表面有增生性牙骨质或者是牙槽骨形成。2统计学分析根据牙再植后愈合方式不同,计算各组各种愈合平均百分比。牙骨质愈合(CH)各组的平均百分比为:A-CH(95.104±4.343)%、B-CH(18.021±5.417)%、C-CH(21.450±4.504)%、D-CH(22.939±8.457)%;牙根替代性(RR)各组的平均百分比为:A-RR(4.897±4.433)%、B-RR(69.618±5.322)%、C-RR(71.549±5.183)%、D-RR(71.701±5.639)%;牙根炎症性吸收各组平均百分比为:A-IR0、B-IR(12.361±4.261)%、C-IR(7.001±4.623)%、D-IR(5.360±4.798)%;分别用Kruskal-WallisTest检验四组各种愈合百分比,P均小于0.05,有统计学意义,可认为各种愈合方式在四组间发生率不完全相同。用Mann-WhitneyU法进行组间两两比较,A组与其他各组P<0.05,有统计学意义,即刻再植愈后最好;其他各组P均大于0.05,无统计学意义。结论:1牙脱位后即刻再植预后最好,能达到理想的牙骨质愈合。2bFGF与Bio-oss骨粉联合或单独使用可在一定程度上有利于牙骨质愈合,抑制牙根炎症性吸收,但是无统计学意义,所以尚不能认为其能有效地抑制脱位牙延迟再植的牙根吸收。
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