迷迭香组织培养及体内迷迭香酸和鼠尾草酸含量测定

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迷迭香(Rosemarinus officinalis L.)系唇形科(Labistae)迷迭香属多年生常绿亚灌木,原产于环地中海沿岸,现在欧洲,美国,中国等地区均有分布。迷迭香中的抗氧化成分主要为鼠尾草酸、鼠尾草酚、迷迭香酚、熊果酸、迷迭香酸等。所以具有抗炎、抗菌抗病毒、抗肿瘤、免疫调节、抑制尿酸生成等多方面的药理作用,主要应用在食品保藏技术,化妆品和医药等方面。可以通过诸多方法来更多地获得迷迭香中的有效成分,比如通过更恰当的栽培技术,掌握正确的采收时间和方法,更充分的分离提取有效成分等措施来达到目的。本文主要研究了迷迭香的组培技术,以成对腋芽和顶芽为外植体,探讨不同6BA和IBA的浓度及其配比对芽的诱导分化,增殖,伸长以及生根的影响。确定了一套迷迭香的组培体系,外植体消毒使用5%次氯酸钠灭菌4min的方法,选用MS为基本培养基,培养基的pH为5.8。初始培养阶段培养条件选用的生长调节激素和激素浓度为6-BA0.5mg/L,蔗糖20g/L以及琼脂6.5g/L。腋芽增殖诱导及分化培养阶段培养条件为6-BA0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L,生根培养阶段培养条件:IBA0.5mg/L+suc20g/L+agar6.5g/L。并通过HPLC的方法检测迷迭香组培苗中迷迭香酸和鼠尾草酸的含量,确定了的迷迭香组培苗中迷迭香酸和鼠尾草酸HPLC的检测条件:流动相:鼠尾草酸流动相配比为甲醇:水:磷酸=85:15:0.1(v/v/v),迷迭香酸流动相配比为甲醇:水:磷酸=55:45:0.1(v/v/v),流速:1ml/min,检测波长:迷迭香酸的检测波长为330nm,鼠尾草酸的检测波长为230nm,柱温:25℃。由于生长条件的改变,迷迭香中的主要抗氧化成分迷迭香酸,鼠尾草酸在植株体内的含量也有变化,组培条件下两种酸的含量较平时要高。
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