金花葵花总黄酮提取、纯化、分离制备及抗氧化性研究

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金花葵(Hibiseu Smanihot L.)又名菜芙蓉、野芙蓉,一年生草本锦葵科秋葵属植物,其花含有很高的生物黄酮活性成分。本课题对金花葵花总黄酮的提取、纯化、高速逆流色谱分离工艺条件进行了详尽的研究,并测定了金花葵花总黄酮纯化液及分离产物的抗氧化性能。主要研究结果如下:1.在单因素试验基础上,采用L9(34)正交试验对金花葵花总黄酮提取工艺条件进行了优化研究。结果表明在乙醇提取浓度60%、料液比1:35、提取温度90℃、提取时间4h的条件下,总黄酮提取率可达到38.67%。2.采用从12种树脂中优选的聚酰胺树脂,在提取液上样量50mL、上样液浓度4.37mg/mL、上样pH值6.0、上样流速1.0mL/min、水洗体积5BV、5BV80%乙醇洗脱、洗脱流速1.0mL/min的条件下,金花葵花总黄酮纯度可达到72.6%,精制倍数1.9。3.通过对6种金花葵花总黄酮高速逆流色谱分离溶剂体系筛选,得出乙酸乙酯-甲醇-水(10:04:10)为最优溶剂体系;在所优选的主机转速900rpm、流动相流速2.0mL/min、水浴温度30℃的条件下,分离物金丝桃苷和葛根素的纯度分别为94.19%和94.58%。4.抗氧化性能方面,还原力测定表明,0.2-1.0mg/mL浓度下,还原力大小依次为分离物金丝桃苷、金花葵花总黄酮、对照Vc、分离物葛根素;DPPH法测定表明,在浓度1.0mg/mL条件下,分离物金丝桃苷含抗氧化成分548.35mgVc/100g、金花葵花总黄酮纯化物含抗氧化成分380.64mgVc/100g、分离物葛根素含抗氧化成分349.24mgVc/100g;FRAP法测定表明,在浓度1.0mg/mL条件下,分离物金丝桃苷能还原产生659.01mmolFeSO4/100g、其次是金花葵花总黄酮能还原产生556.38mmolFeSO4/100g、对照Vc能还原产生465.88mmolFeSO4/100g、分离物葛根素能还原产生339.24mmolFeSO4/100g。
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