野菊花成分稳定性与药材质量研究

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研究目的:野菊花为菊科菊属多年生草本植物野菊(Chrysanthemum indicum L.)的干燥头状花序,始载于《名医别录》,述其“苦、辛,微寒”,具有“清热解毒、平肝”之功效。现代药理研究表明野菊花具有广谱抗菌消炎、抗病毒、降血压、利胆保肝、抗氧化等作用。为了更好地开发利用野菊花资源和评价野菊花药材的质量,本论文拟系统地考察提取、纯化工艺对野菊花提取物成分的影响,不同条件下蒙花苷的稳定性;从野菊花IR图谱、HPLC指纹图谱和抗氧化作用等方面来研究不同蒙花苷含量的野菊花药材的质量。研究方法与结果:1.提取工艺对野菊花提取物成分影响的研究采用四因素三水平正交试验设计方法考察提取工艺对野菊花提取液中总黄酮和蒙花苷的影响,优化出的最佳工艺为:50%乙醇,80℃水浴回流提取3次,每次1 h。2.纯化工艺对野菊花提取物成分影响的研究探讨不同吸附、解吸条件下DM130型大孔树脂纯化野菊花提取液时对总黄酮回收率的影响,得到最佳工艺为:采用质量浓度(以总黄酮计)为2.78 mg/mL的野菊花样品溶液(pH=3-4),以2 mL/min流速上样,待吸附30 min后,先用水洗至流出液无色,再用5倍柱体积80%乙醇以2 mL/min洗脱。总黄酮的回收率为79.19%,纯度为37.31%。3.野菊花中蒙花苷稳定性的研究采用HPLC法测定蒙花苷含量,研究炮制过程、贮存环境和时间对野菊花药材中蒙花苷稳定性的影响;考察野菊花水提液在不同pH、添加剂环境的条件下蒙花苷的含量变化;以及干燥过程对野菊花浓缩液中蒙花苷含量的影响。结果表明野菊花炒炭品中蒙花苷的损失较大,贮存环境和贮存时间对野菊花药材中蒙花苷的稳定性影响不大;不同的添加剂和pH值环境下的野菊花水溶液中的蒙花苷含量变化不一;野菊花浸膏中蒙花苷损失程度随干燥温度的升高和干燥时间的延长而增加,采用喷雾干燥方式能较好地减少浓缩液中蒙花苷的损失。4.野菊花IR图谱的研究确定了野菊花的7个共有特征峰,分别为:2924 cm-1、1737 cm-1、1655 cm-1、1514 cm-1、1376 cm-1、1245 cm-1、1051 cm-1;而未检出蒙花苷色谱峰的野菊花和来源于湖北随县洪山双河的野菊花的红外光谱在414 cm-1、1414 cm-1、1641 cm-1波数处均有吸收,其它产地的野菊花于这三个波数处无吸收。不同蒙花苷含量的野菊花IR图谱之间的相似度差异较大,二阶导数图谱能较好地区分直观分析上较为相似的IR图谱。5.野菊花HPLC指纹图谱的建立与运用采用RP-HPLC法建立不同蒙花苷含量的野菊花的HPLC图谱,并进行相似度评价。结果表明不同蒙花苷含量的野菊花的HPLC图谱之间有一定差异。将所建立的指纹图谱色谱条件运用于考察野菊花的炮制品及制剂干燥过程。结果显示,野菊花蒸制品、酒炙品与生品HPLC图谱的相似度较好,而炒炭品则相对较差;采用喷雾干燥法能较好地保留浓缩液中的化学成分。6.野菊花水提液的抗氧化作用的研究选择SOD活性和MDA含量两个药理指标,严格按照试剂盒检测方法进行试验,考察了不同蒙花苷含量的野菊花水提液的抗氧化效果。结果显示,不同蒙花苷含量的野菊花水提液均能在一定程度上影响小鼠血清中的SOD活性和MDA含量,均具有一定的抗氧化作用,但三者之间差异不明显,其中蒙花苷含量高的野菊花水提液的抗氧化效果相对较优。结论:本论文研究结果表明提取、纯化、添加剂、pH值、干燥温度和干燥时间均会在一定程度上造成含野菊花制剂中蒙花苷含量的降低,不同产地、不同蒙花苷含量的野菊花药材IR图谱、HPLC图谱均具有一定的差异性。为提高含野菊花制剂中蒙花苷的保留率,更好地评价及开发利用野菊花提供参考。
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