恶性肿瘤已成为当今严重威胁人类健康的疾病,其中乳腺癌及卵巢癌有日渐迅猛增长的趋势。卵巢肿瘤是女性生殖器官三大恶性肿瘤之一,是致死率最高的妇科恶性肿瘤。卵巢肿瘤I期和II期预后较好,但疾病发现时多数已属于III期和VI期,而此时患者的5年生存率仍徘徊在35%左右。其致死率高的首要原因是早期发生了远处转移。一直以来都以手术联合紫杉醇和铂类为基础的化疗,以及术中及术后腹腔灌注化疗、及靶向的新型药物共同应用提高患者的生存率,但效果不容乐观。卵巢恶性肿瘤包括上皮性肿瘤(EOC)、生殖细胞肿瘤、性索-间质肿瘤等。虽然对于卵巢癌的研究众多,但对于卵巢癌的发病机制还不是很清楚,仍没有特异性及敏感性的俱佳的早期诊断方法。所以明确不同分类卵巢癌的发生发展的分子机制及新的生物标志物,为提高卵巢癌患者的诊断及监测探索新方法显得尤其重要。叉头框蛋白Q1(forkhead box Q1,FOXQ1)是叉头框转录因子家族的一员,作为一类核转录调控因子,涉及胚胎发育、生物老化、糖类和脂类代谢、细胞周期调控等生物学过程;其突变和表达异常与肿瘤发生均有关。FOXQ1与上皮间质转化过程密切相关,参与上皮间质转化(如TGF-β/Smad信号通路、Ras/PI3k信号通路等)相关信号通路的传导,是EMT发生过程中的一个关键因子。文献报道:FOXQ1受TGF-β1多条调节作用于下游靶基因影响E-cadherin和N-cadherin的表达,使上皮细胞发生间质转化获得迁移和侵袭能力。上皮-间质转化(EMT)是指呈现上皮样表型的细胞失去极性,表现出增强的活动能力,在细胞基质间能够自由移动且呈现纤维样表型的转化过程。在肿瘤细胞中能形成局部浸润以及远处转移,是患者术后复发的重要因素。本研究应用荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)方法和免疫组织化学染色法检测正常卵巢组织、良性卵巢上皮组织及卵巢癌上皮组织中FOXQ1、E-cadherin、N-cadherin、TGF-β1和VEGF的mRNA和蛋白表达情况,统计其表达趋势,分析与上皮性卵巢癌患者临床病理特征之间的关系,并分析上述因子表达相关性。目的本文研究目的在于观察叉头框蛋白Q1(FoxQ1)、E-钙黏蛋白(E-cad)和N-钙黏蛋白(N-cad)、转化生长因子β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)在正常、良性、恶性卵巢上皮组织中的表达情况,并分析三组间在蛋白表达的相关性,探讨其变化可能的意义。研究对象和实验方法1.研究对象:研究病例来源于2013年1月~2015年12月郑州大学第三附属医院行手术治疗的117例患者的卵巢上皮组织,117例患者年龄17~76岁、平均48.3岁。其中,上皮性卵巢癌患者40例(恶性组)、良性上皮性卵巢肿瘤患者39例(良性组)来源于因良性卵巢肿瘤行附件切除患者;研究纳入的标准:术前均未行放化疗等辅助治疗。所有病例均经手术和病理证实。经过伦理委员会批准及受试者同意后进行收集。2.研究方法:应用荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)方法和免疫组织化学染色法分别检测各组卵巢上皮组织中FOXQ1、E-cad、N-cad、TGF-β1、VEGF的mRNA和蛋白表达,可采用Spearman相关分析法分析上述各指标之间的相关性。3.统计学方法:采用SPSS21.0软件进行数据处理。正态分布定量资料采用均数±标准差检验表示,非正态分布的定量资料采用中位数(四分位间距)表示。组间比较采用单因素方差分析。定性资料比较用卡方检验;组间两两比较时检验水平α′=α/比较次数=0.0167。检验水准为α=0.05。相关性分析采用Spearman相关性分析法。结果1.3组组织中FOXQ1、N-cad、E-cad、TGF-β1和VEGF mRNA的表达比较FOXQ1、N-cad、TGF-β1、VEGFmRNA在正常组、良性组、恶性组中的相对表达量分别,0.901(0.654,1.982)、3.099(0.389,4.617)、6.715(0.310,9.180);1.097(0.712,2.097)、3.003(0.334,4.873)、5.065(0.987,6.234);0.130(0.981、7.123)、0.622(0.530,8.300)、0.813(0.660,2.520);1.310(0.908,2.091)、2.009(1.009,2.314)、4.876(2.098,5.091)。组间比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。E-cadmRNA在正常组、良性组、恶性组中的相对表达量分别为7.912(1.091,9.712)、3.880(0.590,4.173)、2.395(1.250,3.875)。组间比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。2.3组组织中FOXQ1、N-cad、E-cad、TGF-β1和VEGF蛋白的表达比较FOXQ1、N-cad、TGF-β1和VEGF蛋白在正常组中低表达,在恶性组中高表达,组间比较差异均有统计学意义(P均<0.0167);E-cad在正常组中高表达,在恶性组中低表达,组间比较差异均有统计学意义(P均<0.0167)。3.上皮性卵巢癌中FOXQ1、N-cad、E-cad、TGF-β1和VEGF蛋白的表达与临床病理特征的关系上皮性卵巢癌中FOXQ1、E-cad、N-cad、TGF-β1、VEGF表达与临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。而与患者年龄、组织类型、组织学分级无关(P均>0.05)4.FOXQ1、N-cad、E-cad和TGF-β1蛋白在上皮性卵巢癌中表达的相关性分析经Spearman法检验,在上皮性卵巢癌组织中,FOXQ1与E-cad蛋白表达呈负相关(r=-0.481,P<0.05),与N-cad在蛋白表达水平呈正相关(r=0.305;P<0.05)。TGF-β1与VEGF在蛋白表达水平呈正相关(r=0.531,P<0.05)。结论1.上皮性卵巢癌组织中TGF-β1、FOXQ1、VEGF和N-cad mRNA和蛋白表达增高,E-cadmRNA和蛋白表达降低,TGF-β1FOXQ1E-cadherinEMT可能作为一个新的致癌信号通路参与上皮性肿瘤的发生发展。2.FOXQ1,N-cad,E-cad,TGF-β1和VEGF在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率与FIGO分期、淋巴结转移有关。3.FOXQ1与上皮性卵巢癌的EMT现象相关,可能在卵巢癌侵袭转移中发挥重要作用。