鸡毒支原体是一种能导致鸡慢性呼吸道疾病的重要病原体。感染鸡会出现死亡率增加、增重率减少和产蛋率下降,对畜禽养殖业造成了严重的经济损失。虽然现在有多种抗生素被用于治疗和预防鸡毒支原体感染,例如四环素类、大环内酯类、喹诺酮类和截短侧耳素类药物,但是长期滥用或者错用抗生素会促进鸡毒支原体对抗生素耐药性的产生。因为鸡毒支原体的体积小并且没有细胞壁,只能在特制的培养基中生长,成功培养鸡毒支原体较为困难,因此关于鸡毒支原体的研究很少。突变选择窗理论假设存在这样一个危险的浓度范围,使得耐药突变菌可以被选择性地富集。首先挑选了添加到培养基中最适合鸡毒支原体在平板上生长的动物血清,并且在体外测定了达氟沙星、多西环素、替米考星、泰乐菌素和沃尼妙林对鸡毒支原体S6株株的突变选择窗。液体培养基中以MIC₉₉和MPC为添加药物浓度,测定了这五种药物对鸡毒支原体S6株株的杀菌效果。综合考虑形态学和鸡毒支原体在琼脂平板上的数量这两个因素,四种血清添加后对鸡毒支原体生长的促进能力进行排序分别为猪血清>马血清>牛血清>混合血清。MPC/MIC₉₉大小分别为:达氟沙星>替米考星>泰乐菌素>多西环素>沃尼妙林。在培养基中添加药物浓度为MPC时,药物的杀菌效果比添加浓度为MIC₉₉的杀菌效果明显。当培养基中添加药物浓度为MPC、接菌量为10⁵¹0⁹ CFU/mL时,沃尼妙林的杀菌效果最差,达氟沙星的杀菌效果最强。研究了多西环素对鸡毒支原体S6株的杀菌效果。在体外静态杀菌曲线中,药物浓度是固定不变的（0⁶4 MIC）,测定了细菌数量的变化,并且通过计算杀菌速率来评价药效。建立了体外动态模型（药物浓度是变化的）,模拟药物的两个半衰期6.78和12 h,采集样品测定多西环素的药物浓度和细菌数量。在体外静态杀菌曲线中,多西环素产生的最大杀菌效果是使得细菌数量下降了5.62 Log₁₀ CFU/mL,并且最大杀菌速率为0.11 h^-1。在体外动态模型所模拟的两个半衰期中,多西环素产生的最大杀菌效果是使得细菌数量分别减少了4.1（6.78 h）和4.75 Log₁₀ CFU/mL（12 h）。此外,%T>MIC是最适合的PK-PD参数,相关系数R²为0.986(C_max/MIC的R²为0.897,AUC _{0-48 h}的R²为0.953)。当给药间隔为48 h时,细菌数量下降0、2和3 Log₁₀CFU/mL所对应的%T>MIC分别为32.48%、45.68%和54.36%。因此在体外模型中,多西环素对鸡毒支原体S6株的杀菌效果强,且呈时间依赖性。在体外动态模型中模拟达氟沙星的药物浓度变化,使其在MIC₉₉以下,MIC₉₉和MPC之间,以及MPC之上。从不同的给药剂量中阐述PK-PD参数与鸡毒支原体S6株对达氟沙星耐药性产生的相互关系。在整个试验过程中,检测达氟沙星药物浓度、细菌数量和敏感性变化。又测定了耐药菌株在gyrA、gyrB、parC和parE基因上的突变情况以及是否包含有外排泵耐药机制。当药物浓度处于突变选择窗的下部时,鸡毒支原体对达氟沙星的敏感性降低。用PK-PD参数来表示,就是当0.37 h<AUC_{24 h}/MPC<14.47 h时,会出现耐药菌株的富集。在所有的耐药突变株中都检测到相对于大肠杆菌gyrA基因的83位发生氨基酸的替代（Ser83→Arg）。但是在MIC最高的耐药菌株中发现了gyr A基因的83位和parC 64位（Ala64→Ser）的突变。此外,测定耐药菌株的MIC时添加利血平和CCCP后,敏感性不变。结果说明鸡毒支原体对达氟沙星耐药的外排泵系统可能并没有被激活。建立鸡毒支原体体内感染模型。给感染雏鸡达氟沙星灌胃给药,一天一次,连续3天。不仅测定了达氟沙星在血浆和肺组织中的药物浓度,还监测了气囊和肺组织中细菌的数量和敏感性变化,并鉴定了耐药菌株在gyrA、gyrB、parC和parE基因上的靶位突变情况。此外,还检测了耐药菌株对恩诺沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、加替沙星和诺氟沙星的MIC。药动学结果显示达氟沙星在肺组织中的药物浓度比血浆中的高,当给药剂量超过2.5 mg/kg时,达氟沙星对鸡毒支原体的抗菌效果显示出杀菌性。细菌数量下降2和3 Log₁₀ CFU/mL所对应的AUC_{24 h}/MIC的值分别为31.97和97.98L·h/kg。在1和2.5 mg/kg剂量下筛选出的耐药突变菌株的gyrA基因的83或者87位发生氨基酸的替代（Ser83→Arg,Glu87→Gly）,在parC基因的84位发生氨基酸的替代（Glu84→Lys）。在gyrA的83位发生突变的鸡毒支原体耐药菌株对达氟沙星、恩诺沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、加替沙星和诺氟沙星的MIC比在gyr A的87位发生突变的耐药菌株要高。经过推到计算,连续三天以5.5 mg/kg剂量的达氟沙星对治疗鸡毒支原体病的感染是有效的。