灵芝—黄芪液体发酵条件优化及缓解体力疲劳功能研究

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在中药创新药物的研发方面,长期以来都仅局限于从现有药材中寻找有效成分,但是从现有植物资源中发现结构新颖并有药用价值的有效成分已经越来越难,而且部分中药有效成分的水溶性或稳定性不好,又或者毒副作用太强,也都严重影响了它们的应用。要解决以上问题,进行中药的生物转化是有效的途径之一。利用微生物的代谢体系或是其酶类的催化作用,经过一系列的化学反应,将底物(中药)中的化学成分结构进行修饰,使中药产生新的药用价值,或是降低中药的毒副作用,或是提高中药原有药效,为创新中药的研发提供新材料。基于微生物的生物转化技术具有安全性高、投资少、周期短等优势,对解决能源、环境的矛盾具有积极的意义。灵芝隶属于真菌界(Kingdom Fungi),担子菌门(Basidiomycota),担子菌纲(Basidiomycetes),灵芝目(Ganodermatales),灵芝科(Ganodermataceae)。灵芝在我国已经有上千年的应用历史,现代研究表明其具有抗肿瘤、提高机体免疫功能等多种功效。本论文建立药效筛选平台,确定灵芝-黄芪发酵组合为研究对象,主要对其进行了培养条件的优化和缓解体力疲劳功能的研究。1.论文选择了7味中药,与灵芝进行组合发酵,以小鼠负重游泳试验、戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠试验、小鼠急性缺血性缺氧试验、对S180荷瘤小鼠瘤重的影响实验为筛选平台,考察了7味中药与灵芝共发酵后,其液体发酵产物在缓解体力疲劳、改善睡眠、耐缺氧、抗肿瘤方面的功效作用,并研究了这7味中药的提取物对液体发酵灵芝生物量的影响,最后确定以灵芝—黄芪发酵产物为后续研究对象。2.对灵芪液体发酵条件进行筛选与优化,选择了灵芝、紫芝、GL-1.025,分别与膜荚黄芪、蒙古黄芪组合发酵,在6种组合中,筛选出GL-1.025—蒙古黄芪组合具有较好的缓解体力疲劳的作用,且成本最低。并确定了黄芪的最适添加方式为粉剂;最适添加量为10g/L。在确定了灵芪液体发酵的最适条件后,进行了50L液体发酵罐的扩大培养实验,监测了灵芝—黄芪液体发酵过程的变化,结果发现,添加黄芪后,灵芝的液体发酵与单独的液体发酵灵芝相比,过程没有发生改变,可进行扩大培养。3.将灵芪发酵物进行负重游泳实验、血乳酸、血清尿素氮和肝糖原测定后发现,灵芪发酵物能提高动物运动耐力,增加机体糖原储备,降低运动后机体血清尿素含量,证实灵芪发酵物具有缓解体力疲劳的作用。并通过负重游泳实验、血清尿素氮的测定,研究灵芪发酵物的最适用量。通过小鼠急性毒性实验研究表明灵芪发酵物安全无毒。
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