青藤仔生物活性筛选及基于网络药理学的抗炎机制研究

来源 :广西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:joey_don
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:对壮药青藤仔的化学成分、生物活性和抗炎分子机制进行研究。方法:利用气相色谱-质谱(GC-MS)、超高液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)以及热裂解气相色谱-质谱联用技术(PY-GC/MS)对青藤仔乙醇总提取物的化学成分进行分析;以青藤仔乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水部位为研究对象,采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型对青藤仔不同极性部位的抗炎活性进行筛选,利用DPPH˙和ABTS+˙自由基清除实验测定青藤仔不同极性部位的抗氧化活性,通过牛津杯法和MTS法研究青藤仔不同极性部位的抑菌和抗肿瘤活性,综合评价其不同极性部位的抗炎、抗氧化、抑菌和抗肿瘤活性;建立角叉菜胶致小鼠足肿胀的急性炎症模型和棉球致小鼠肉芽肿慢性炎症模型,并通过观察炎症部位的病理学变化和测定血清中炎症因子的含量,进一步评价青藤仔乙酸乙酯部位的抗炎活性;通过网络药理学的方法,对青藤仔抗炎活性的分子机制进行研究。结果:青藤仔乙醇总提取物的成分分析结果表明,从GC-MS中解析出反油酸乙酯、油酸酰胺等30个化学成分,从UPLC-MS/MS中推测出咖啡酸、槲皮素等16个化合物,从PY-GC/MS中解析出1,4,5,6-四羟基-3-甲氧基己烷-2-酮等17个成分;二甲苯致小鼠耳肿胀实验表明,青藤仔不同极性部位具有较好的抗炎活性,其中乙酸乙酯部位高剂量组(6.68g/kg)对小鼠耳肿胀具有显著的抑制效果(P<0.01),抑制率为75.56%,与阳性对照药地塞米松(6.8 mg/kg)效果相当;抗氧化结果显示,青藤仔的正丁醇部位、乙醇部位、乙酸乙酯部位三个部位对DPPH˙和ABTS+˙自由基表现出良好的清除效果。石油醚部位和水部位的抗氧化活性均低于阳性对照BHT和VC;牛津杯抑菌结果表明,青藤仔不同极性部位浓度为200 mg/m L时,对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌均没有明显的抑制作用;MTS结果显示,青藤仔不同极性部位浓度为200μg/m L时,对Hep G2、Hela、MCF-7和HL-60肿瘤细胞均有一定的抑制效果,其中乙酸乙酯部位的抑制效果较好,抑制率分别达到59.94%、82.50%、64.43%、65.78%。此外,青藤仔乙醇部位(200μg/m L)对Hela细胞也具有较好的抑制效果,抑制率为57.60%,利用两点法计算青藤仔乙酸乙酯部位对Hep G2、Hela、MCF-7和HL-60的IC50值,依次为150.03±6.26、65.13±3.12、94.63±3.07、110.45±3.88mg/m L,青藤仔乙醇部位对Hela细胞的IC50为187.86±10.91 mg/m L;进一步对青藤仔乙酸乙酯部位进行抗炎活性评价,研究发现,乙酸乙酯部位高剂量组(6.68 g/kg)可以显著降低小鼠足肿胀度和减少肉芽组织的形成(P<0.01);病理切片结果表明,与正常足跖组织相比,模型组小鼠足跖组织可见丰富的中性粒细胞浸润,局部可见少量淋巴细胞浸润,给药组均可以不同程度的降低炎性细胞浸润;ELISA检测结果显示,与模型组相比,地塞米松组和给药组小鼠血清中炎症因子NO、i NOS、IL-6、IL-1β、COX-2的表达量减少(P<0.01)。通过网络药理学方法,从青藤仔中筛选得到萜类、黄酮类、有机酸类、酚类、烃及烃的衍生物等25个化学成分,涉及149个炎症靶点;为获取其中的关键蛋白,本研究采用PPI进行分析,得到APP、EGFR、JUN等20个关键靶点;富集分析结果主要涉及一碳代谢、碳酸氢盐运输过程、对药物的反应、氧化还原过程等生物过程,靶点富集共73条信号通路,其中有15条信号通路为最显著富集,包括nitrogen metabolism、neuroactive ligand-receptor interaction、steroid hormone biosynthesis、retrograde endocannabinoid signaling、prolactin signaling pathway、inflammatory mediator regulation of TRP channels、c AMP signaling pathway、serotonergic synapse、proteoglycans in cancer、PPAR signaling pathway、estrogen signaling pathway、pathways in cancer、calcium signaling pathway、progesterone-mediated oocyte maturation、gap junction等通路,共同发挥抗炎活性的多重调控作用。结论:通过对青藤仔乙醇总提取物的化学成分进行分析,共确定出63个化合物,主要包括酯类、酰胺类、酚类、醇类、黄酮类、生物碱类、甾体类、萜类等成分;青藤仔生物活性结果表明,青藤仔不同极性部位具有显著的抗炎、抗氧化活性和一定的抗肿瘤活性,但对细菌的抑制作用不明显;青藤仔乙酸乙酯部位抗炎活性结果表明,该部位高剂量组(6.68g/kg)对急性、慢性炎症均具有很好的抑制效果,组织病理切片结果与研究结果较为一致,通过对小鼠血清中炎症因子的含量测定,推测青藤仔发挥抗炎活性的作用机制可能与抑制NO、i NOS、IL-6、IL-1β、COX-2等炎症因子的生成有关。网络药理学研究结果显示,青藤仔中的25个活性成分可以通过APP、EGFR、JUN等20个关键靶点,对nitrogen metabolism、neuroactive ligand-receptor interaction、steroid hormone biosynthesis、retrograde endocannabinoid signaling、prolactin signaling pathway、inflammatory mediator regulation of TRP channels等多条通路进行调控,共同发挥抗炎活性,具有多成分、多靶点、多通路的特点,本研究为青藤仔的进一步开发利用及其抗炎作用机制研究提供了参考依据。
其他文献
为优化鱼油的脱色工艺,首先通过单因素试验确定脱色效果最佳的固体吸附剂,其次探究脱色温度、固体吸附剂添加量、脱色时间对鱼油脱色率的影响。在此基础上,采用Box-Behnken(BB)试验设计对鱼油脱色条件进行优化,并对BB试验结果进行响应面法(RSM)和人工神经网络(ANN)分析。结果表明:活性白土的脱色效果最佳,随着脱色温度、固体吸附剂添加量、脱色时间的增加,脱色率呈先上升后下降的趋势;RSM和A
期刊
随着儿童人口数量的增加,国家对儿童教育方面的大力投入,以及教育减负政策的实施,留给儿童自由掌握的时间越来越多,然而,过多孩子沉迷于网络和游戏,不愿到户外去进行运动锻炼,加之周边游乐场地过少,社区公园缺乏互动创新性等原因,儿童户外活动的时间往往有限。通过以唐山朝阳公园景观改造为例,从解决朝阳公园儿童互动性景观具体问题入手,对城市社区公园儿童互动性景观进行研究探讨。基于儿童身心健康发展为背景,以城市社
学位
<正>萧统从传世无名氏《古诗》中选录十九首编入《文选》成《古诗十九首》,编者把这些作者已经无法考证的五言诗汇集起来,冠以此名,列在“杂诗”类之首。《昭明文选·杂诗·古诗一十九首》注释中曾明确标注:“并云古诗,盖不知作者。”曾有说法认为其中有曹植、枚乘、王粲、傅毅等人的创作,例如其中八首《玉台新咏》题为汉枚乘作,但没有根据,后人多疑其不确。如曹植《送应氏》描写过洛阳被焚毁后的萧条景象,而《十九首》的
期刊
作为生物学课程的育人目标,生物学科核心素养是体现学科育人价值的特异性且具象化的表达。本研究围绕核心素养提出的时代背景、生物学科核心素养与生命观念核心素养研究进展等方面进行梳理与综述。在未来的实践推进中,教师需要在宏观层面把握核心素养培育的要义与指向,从理论层面分析生物学科核心素养的落地性,从实践层面关注生命观念核心素养培育的切实性,进而为生物学科核心素养的培育丰富落地案例。
期刊
质子交换膜燃料电池(Proton Exchange Membrane Fuel Cell,PEMFC)具有能量密度高、启动快、清洁无污染等优点,在发电、交通等领域均具有良好的应用前景。但PEMFC是一个多物理场耦合的非线性复杂系统,在运行过程中容易发生水淹、干燥和缺气故障致使其具有较低的可靠性和耐久性,从而在一定程度上制约了其商业化应用进程。因此,通过可靠的故障诊断策略及时辨识燃料电池发生的各类故
学位
针对混合动力汽车发动机最优运行曲线(OOL)离线台架标定工作量大、且实际道路工况下难以获得最优转速问题,提出了混合动力汽车发动机最优运行曲线在线优化方法。首先,建立混合动力汽车仿真模型,并通过冬天城市工况下的仿真验证了模型的精度;其次,提出了基于带遗忘因子递归最小二乘(RLS)的目标梯度估计方法,利用实时数据实现了最佳运行曲线优化过程中比油耗目标梯度的精确计算;然后,提出了基于梯度下降的发动机最佳
期刊
数形结合的教学,可以帮助孩子们在原本的数学基础和概念上更加容易理解,把一些复杂抽象的数学知识和概念变化成为一种直接明了的方式和语言,如果学生们加强对数形结合的使用和理解,一定可以帮助其开阔视野,提升日常思维的灵活运用,开发出自己的数学思维,帮助孩子们在学习中找到快乐。让学生根据数形结合的方式,开发出自己独特的数学语言,让孩子们能够在数学学习中找到方法,发现乐趣。本文详细地叙述了数形结合教育的优缺点
会议
果酒发酵过程中微生物及其代谢酶引发的一系列生化反应对其风味形成具有重要作用,但目前仍存在生物调控手段不完善,香气形成机理不清晰等问题,制约着我国果酒产品的开发和品质提升。本文对不同果酒中香气化合物种类及其生成途径进行阐述,分析香气前体物质代谢和微生物发酵对果酒香气的贡献;从生物调控角度重点论述不同果酒发酵过程香气成分的变化规律及微生物和酶对果酒香气化合物的影响机制,分析发酵菌种、发酵方式、微生物产
期刊
报纸
<正>新时期“三农”工作的重心已由“脱贫攻坚”转向“全面推进乡村振兴”,农村基层党组织是乡村振兴战略得以有效实施的组织力量和领导核心,是党在农村开展工作、提升战斗力的最主要力量和政治保障。今年中央一号文件明确提出,要充分发挥农村基层党组织领导作用,扎实有序做好乡村发展、乡村建设、乡村治理重点工作,推动乡村振兴取得新进展、农业农村现代化迈出新步伐。习近平总书记前不久在海南省五指山市水满乡毛纳村调研时
期刊