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本研究中,我们通过PCR,获得了茶尺蠖核型多角体病毒(Ectropis obliqua nuclear polyhedrosis virus, EcobNPV) 73.7-78.9kb区域的全长序列,分析结果显示,该区域编码有该病毒的odv-e25、odv-e28和P143。通过对P143的基序分析发现,该蛋白具有典型的helicase解螺旋结构域,基于P143氨基酸序列的系统进化分析表明,EcobNPV属于核型多角体病毒属GROUPⅡ,并且昆虫杆状病毒的进化与宿主是相关联的。我们通过RT-PCR和分段克隆,获得了家蚕质型多角体病毒(Bombyx mori Cytoplasmic polyhedrosis virus)苏州株(BmCPV-suzhou)的S2全长序列。分析显示,BmCPV-suzhou S2片段的全长为3854bp(GenBank登录号:GQ924586),含有一个3678bp的编码RNA Dependent RNA Polymerase(RDRP)基因的开放阅读框,并分别在5’和3’末端发现了保守序列AGUAA和GUUAGCC。基于RDRP氨基酸序列的系统进化分析表明,BmCPV的不同株系与LdCPV1、DpCPV1聚为一类。EcobNPV是茶尺蠖的病原性天敌,可以作为生物杀虫剂来防治茶尺蠖。利用Bac-to-Bac系统,首先构建了包含有BmNPV的多角体基因表达盒和EcobNPV的helicase表达盒的重组转座载体pFastBacTMDual-polh-helicase,并获得了重组病毒BmBacmid-polh-helicase,分子生物学鉴定和感染实验结果显示,该重组病毒具EcobNPV helicase表达盒,并能在细胞核中形成多角体,证明具有双套helicase表达盒的重组病毒能正常复制。