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目的：改进Marmarou法制作大鼠不同程度弥漫性脑损伤模型。观察大鼠中度弥漫性脑损伤后不同时间、不同脑区，凋亡相关基因bcl-2、bax和caspase-3在蛋白质水平表达变化，探讨弥漫性脑损伤后细胞凋亡分子生物机制。 方法：使用改进后的Marmarou致伤装置，以不同冲击力(80cm×450g、120cm×450g和180cm×400g)打击大鼠头部分别制作轻、中、重度弥漫性脑损伤动物模型，观察不同程度损伤后动物神经系统体征、生命体征、感觉运动功能及脑组织病理形态学变化。应用免疫组化方法检测大鼠中度弥漫性脑损伤后不同时间、不同脑区Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白的表达，应用流式细胞仪定量检测伤后不同时间海马区细胞凋亡。 结果：(1)与假手术组相比，不同程度损伤后大鼠神经系统体征、生命体征及感觉运动功能均明显改变，病理学检查证实各致伤组动物均有弥漫性脑损伤，而且随损伤冲击力增加以上各种表现变化程度呈加重趋势。(2)与对照组相比，大鼠中度弥漫性脑损伤后6～12小时大脑皮质Bcl-2蛋白表达下降，于伤后24小时达到最低(P＜0.05)，7天时恢复至打击前水平；伤后6～24小时Bax蛋白表达上升，48小时达到最高(P＜0.05)，7天时仍高于对照组；伤后12小时Caspase-3蛋白轻微表达，24小时表达上升，72小时达到最高(P＜0.01)，7天时仍保持较高水平。海马区Bcl-2蛋白于伤后6小时表达上升(P＜0.05)，12小时表达下降，48小时达到最低(P＜0.05)，7天时仍低于对照组；伤后海马区Bax和Caspase-3蛋白的表达变化与大脑皮质区相似，但其变化程度更明显；Bcl-2和Bax蛋白表达值的均数比(Bcl-2／Bax)与Caspase-3蛋白表达值呈负相关。伤后大脑皮层下白质及丘脑区各蛋白表达变化不明显。(3)与对照组相比，伤后12～48小时海马区细胞凋亡明显增加(P＜0.01)，72小时达到峰值(P＜0.01)，7天时仍明显高于对照组(P＜0.01)；伤后海马区细胞凋亡与Bcl-2／Bax表达比下降及Caspase-3表达上升有关。 结论：(1)改进后的大鼠不同程度弥漫性脑损伤模型稳定、实用、重复性好；中度打击伤组动物死亡率低且病理变化典型，适合动态研究弥漫性脑损伤后的病理生理变化。(2)中度弥漫性脑损伤后，不同脑区存在凋亡相关蛋白表达变化，以海马区最明显。(3)细胞凋亡与弥漫性脑损伤后继发性脑损害有关，bcl-2和caspase基因族重要成员参与了伤后神经细胞凋亡，bcl-2和bax表达比(Bcl-2／Bax)下调可能参与激活caspase-3基因，进而诱导细胞凋亡。提示从不同水平促进抑凋亡基因bcl-2表达，并同时抑制促凋亡基因bax和caspase-3表达，可能有助于减轻弥漫性脑损伤后继发性脑损害。